IL-27對(duì)急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株U937作用的初步研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文IL27對(duì)急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株U937作用的初步研究姓名：劉彬彬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：林東軍20090602中山大學(xué)碩士學(xué)位論文JL27對(duì)急性單核細(xì)胞自血病細(xì)胞株U937作用的初步研究性血液病患者(包括IDA、ITP和非血液病患者)，尤其在AMLM5(急性單核細(xì)胞白血病)病人高表達(dá)，在此基礎(chǔ)上，我們利用人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株U937為研究對(duì)象，探討rhIL27誘導(dǎo)U937細(xì)胞分泌抗腫瘤性細(xì)胞

2、因子，抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作用，發(fā)現(xiàn)rhIL27能夠誘導(dǎo)U937細(xì)胞產(chǎn)生抗腫瘤性細(xì)胞因子TNFCl和IL12，抑制U937細(xì)胞生長(zhǎng)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且細(xì)胞增殖抑制率、細(xì)胞凋亡率與TNFa分泌量呈正線性相關(guān)。我們的工作首次證明，與實(shí)體瘤相似，IL27亦可抑制造血系統(tǒng)惡性腫瘤，具體作用機(jī)制值得進(jìn)一步探討。研究目的一、檢測(cè)人白介素27的兩個(gè)受體(wsx1和gpl30)在急性髓細(xì)胞白血病病人與非惡性血液病病人的骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC

3、s)上的表達(dá)差異；二、研究IL27誘導(dǎo)人單核白血病細(xì)胞U937分泌抗腫瘤細(xì)胞因子TNFQ和IL12，抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。材料和方法一、實(shí)驗(yàn)材料(一)主要儀器設(shè)備C02培養(yǎng)箱，超凈工作臺(tái)，PCR儀，酶標(biāo)儀，核酸蛋白分析儀，臺(tái)式超速離心機(jī)，恒壓電泳儀，凝膠成像分析系統(tǒng)，熒光正置顯微鏡，流式細(xì)胞儀。(二)試劑及細(xì)胞株U937細(xì)胞株；6孔、24孔、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，細(xì)胞培養(yǎng)瓶；小牛血清，RPMll640培養(yǎng)基；淋巴細(xì)胞分離液、瓊脂

4、糖，TRIzol；100bpDNAladdermarker、cDNA第一鏈合成試劑盒、2TaqPCRMasterMi試劑盒；阿糖胞苷(AraC)；四氮甲唑藍(lán)(MTr)、DMSO；人IL12ELISA試劑盒、人TNFQELISA試劑盒。FITCAnnexinVApoptosisDetectionKit，人重組IL27，Hoechst染色試劑盒。二、實(shí)驗(yàn)方法收集我科3l例初治及復(fù)發(fā)成人AML患者骨髓血，同時(shí)采集8例非惡性血液病患者骨髓(包括