基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1及其受體對卵巢上皮性腫瘤生物學(xué)行為的影響.pdf

1、第一部分基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1及其受體在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達(dá) 目的探討基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)及其受體CXCR4在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達(dá)及其臨床意義。 方法分別采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白印跡法(Westernblot)、免疫組織化學(xué)方法檢測22例卵巢上皮性癌組織、8例卵巢交界性上皮性腫瘤組織、10例卵巢良性上皮性腫瘤組織、10例正常卵巢組織中SDF-1/CXCR4mRNA和蛋白的表達(dá)情

2、況，并分析其與患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。 結(jié)果SDF-1/CXCR4蛋白在卵巢上皮性癌組織的癌細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞中呈強陽性表達(dá)，而在卵巢交界性上皮性腫瘤組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織、正常卵巢組織的腫瘤細(xì)胞或腺上皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞中呈弱陽性或陰性表達(dá)。卵巢上皮性癌組織中SDF-1/CXCR4mRNA和蛋白的表達(dá)水平均明顯高于卵巢交界性上皮性腫瘤組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織和正常卵巢組織(P＜0.01)。卵巢上皮性癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者其癌組織

3、中SDF-1/CXCR4mRNA和蛋白的表達(dá)水平明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)；卵巢上皮性癌組織中SDF-1/CXCR4mRNA和蛋白的表達(dá)與其臨床分期、組織學(xué)分級、病理類型無關(guān)(P＞0.05)。 結(jié)論基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)及其受體CXCR4在卵巢上皮性癌組織中呈高表達(dá)，其表達(dá)水平與卵巢上皮性癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。 第二部分基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1及其受體對卵巢上皮性癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響 目的以人

4、卵巢上皮性癌細(xì)胞株CAOV3、OVCAR3、SKOV3、COC1為研究對象，探討基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)及其受體CXCR4的表達(dá)，及其對卵巢上皮性癌細(xì)胞的生長、增殖、趨化、侵襲能力的影響。 方法采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白印跡法(Westernblot)檢測卵巢上皮性癌細(xì)胞中SDF-1/CXCR4mRNA和蛋白的表達(dá)情況。以SDF-1細(xì)胞因子、CXCR4中和抗體作用于卵巢上皮性癌細(xì)胞后，通過MTT法檢測

5、細(xì)胞的增殖反應(yīng)；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及凋亡情況；免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測細(xì)胞PCNA蛋白表達(dá)的變化，并利用Transwell小室檢測細(xì)胞的趨化和侵襲能力。 結(jié)果人卵巢上皮性癌細(xì)胞株CAOV3、OVCAR3、SKOV3、COC1均可檢測到CXCR4mRNA和蛋白的表達(dá)；而均未檢測到SDF-1mRNA和蛋白的表達(dá)。SDF-1細(xì)胞因子作用于卵巢上皮性癌細(xì)胞后，細(xì)胞生長曲線顯示細(xì)胞生長速度增快；細(xì)胞周期中DNA合成期細(xì)胞數(shù)量明顯增多；細(xì)胞

6、核中的PCNA蛋白表達(dá)顯著增高；穿透重組基底膜的細(xì)胞數(shù)目明顯增多；差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，CXCR4中和抗體可以在一定程度上抑制這些作用。 結(jié)論基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)及其受體CXCR4的相互作用可以促進卵巢上皮性癌細(xì)胞的生長、增殖，增強卵巢上皮性癌細(xì)胞的趨化、侵襲能力，可能與卵巢上皮性癌的生長、轉(zhuǎn)移有關(guān)。 第三部分阻斷基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1生物活性對裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生成和轉(zhuǎn)移的影響 目的

7、探討阻斷基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1生物活性對裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生成和轉(zhuǎn)移的影響 方法應(yīng)用CXCR4中和抗體封閉CAOV3細(xì)胞的SDF-1受體后，注射到裸鼠皮下成瘤，觀察成瘤時間，腫瘤體積，成瘤率，生存時間，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率。 結(jié)果實驗組的成瘤時間、腫瘤體積、成瘤率、生存時間及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率與空白組及對照組比較均有顯著性差異(P＜0.05)，而對照組與空白組比較無顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論通過CXCR4中和抗體阻斷基