miR-205對(duì)卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、中圖分類號(hào)墅魚UDC6lO碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q三三密級(jí)監(jiān)IntR205對(duì)籮日巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響EffectofmiR一205onBiologicalBehaviorinOvarianCancerCellsl5ancerells作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系所)：指導(dǎo)教師：論文答辯日期型竺：篁：塑李龍基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)病理學(xué)與病理生理學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院吳曉英教授答辯委員會(huì)主席塹中南大學(xué)二O一四年五月miR205對(duì)卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影

2、響摘要：背景：卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，在全球女性婦科腫瘤中死亡率位列第二位。由于卵巢癌早期癥狀不明顯，又尚未有有效的腫瘤標(biāo)記物來進(jìn)行預(yù)警和早期診斷，在進(jìn)展期卵巢癌患者即使接受治療，絕大部分五年生存率仍低于20％oJ。近年來，關(guān)于微小RNA(microRNA，miRNA)調(diào)控基因表達(dá)的研究成為腫瘤研究的新熱點(diǎn)。微小RNA是長約19～25nt的單鏈非編碼小分子RNA，它廣泛存在于植物，非脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物中。miRNA在調(diào)節(jié)細(xì)

3、胞分化，細(xì)胞周期，細(xì)胞凋亡中均發(fā)揮著重要作用。目前有超過900種miRNA在人體中被發(fā)現(xiàn)【2】。miR一205定位于lq322，是一段uccuucauuccaccggagucug編碼的microRNA，在不同種系中呈現(xiàn)高度保守性。miR205作為腫瘤致癌基因或抑制基因取決于特定腫瘤環(huán)境中的靶基因表達(dá)?，F(xiàn)已有研究證實(shí)在不同的癌細(xì)胞株中miR一205發(fā)揮著促進(jìn)腫瘤或抑制發(fā)生發(fā)展的作用【3】。本課題組前期應(yīng)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)有兩種差異蛋

4、白Ezrin和LaminA／C與卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)。同時(shí)，應(yīng)用生物信息學(xué)方法(3個(gè)獨(dú)立軟件TargetScan、DIANAmiroT、PicTar)分別預(yù)測Ezrin、LaminA／C3UTR有結(jié)合位點(diǎn)的miRNA，結(jié)果3個(gè)軟件同時(shí)顯示miR一205在Ezrin、LaminA／C的3UTR均有結(jié)合位點(diǎn)。由此推測miR一205、差異蛋白Ezrin和LaminA／C間存在著調(diào)控關(guān)系，在卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。本文旨在探究miR205

5、對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響，以及miR205表達(dá)與差異蛋白Ezrin和LaminA／C間的關(guān)系。方法：(1)培養(yǎng)人上皮性卵巢癌細(xì)胞系HO8910(氐轉(zhuǎn)移株)、HO8910pm(高轉(zhuǎn)移株)、SKOV3(k乇轉(zhuǎn)移株)及SKOV3ip(高轉(zhuǎn)移株)4株配對(duì)的細(xì)胞系。(2)RealtimePCR檢測miR一205在四株細(xì)胞中的本底水平。(3)RealtimePCR檢測瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR205mimics／inhibitor后四株細(xì)胞中mi