大蒜阿霍烯的純化和酶解轉化的研究.pdf

1、大蒜阿霍烯是一類具有強效抗血栓功能并且沒有大蒜強烈辣臭味的天然穩(wěn)定的活性物質，為開發(fā)生產(chǎn)高附加值的大蒜保健制品，給大蒜深加工綜合利用提供參考依據(jù)，本文研究了以下內容： 初步建立了從鮮蒜中提取分離阿霍烯類活性物質的方法：(1)經(jīng)低溫充分粉碎得到的蒜漿，甲醇浸提后，分別用無水乙醚、環(huán)已烷、二氯甲烷等進行多級萃取，得到了具有大蒜特有臭味的，深黃綠色油狀大蒜提取物；(2)對此提取物經(jīng)160～200目硅膠常壓柱層析分離，得到薄層層析(TL

2、C)Rf值在0.2～0.5范圍內的流分；此流分再經(jīng)真空快速柱層析，分離到薄層層析(TLC)Rf值在0.36左右的流分；將該流分用制備薄層層析進一步純化，得到兩條譜帶，分別為樣品Ⅰ、Ⅱ，經(jīng)高效液相色譜(HPLC)檢測，純度均達到90％以上，液譜-質譜(LC-MS)聯(lián)用分析定性：樣品Ⅰ為阿霍烯類物質，其物理性狀為：無色油狀液體，無明顯大蒜辣臭味。 研究了阿霍烯類物質的分析檢測方法，建立了薄層層析(TLC)法和高效液相色譜(HPLC)

3、法的分析條件。(1)TLC分析條件：硅膠GF254薄層預制板(25mm×100mm)，展開劑：乙酸乙酯，紫外熒光顯色；(2)HPLC分析條件：色譜柱：Diamonsil(R)C-18柱(150mm×4.6mm，5μm)，柱溫28℃C；流動相：含0.1％(V/V)甲酸的水溶液(A溶液)和甲醇(B溶液)，A/B=35∶65(V/V)；二極管陣列檢測器，檢測波長：254nm。 探討了酶解轉化過程對阿霍烯類提取率的影響：考察了大蒜破碎后

4、其內源酶作用過程中的酶解時間、酶解體系pH值和酶解溫度等主要影響因素。在單因素試驗的基礎上進行了二次旋轉正交組合試驗設計，結果表明：酶解時間是影響大蒜中阿霍烯類提取率的顯著因素；阿霍烯類提取率Y與酶解時間(X1)，酶解體系pH值(X2)，酶解溫度(X3)的非線性關系顯著，得到回歸方程：Y=38.06-1.06X1-4.14×X1×X1+2.31×X1×X2-1.52×X2×X2-2.15×X3×X3，能較好地擬合在自變量變化范圍內的試驗