中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)信號(hào)鏈研究.pdf

1、研究目的:探討腦缺血再灌注損傷大鼠模型中局部神經(jīng)系統(tǒng)損傷信號(hào)與外周損傷、修復(fù)功能相關(guān)信號(hào)的表達(dá)聯(lián)系，IL-6/IL-6R在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)信號(hào)鏈中的作用。
　　 研究方法:本論文研究分二個(gè)部分，1）制備腦缺血再灌注損傷大鼠模型，應(yīng)用酶聯(lián)免疫分析技術(shù)分析外周血清中炎癥損傷相關(guān)信號(hào)IL-1β、IL-6、IL-6R和HSP70的表達(dá)情況，應(yīng)用免疫組化技術(shù)分析中樞腦缺血損傷局部損傷及損傷修復(fù)相關(guān)信號(hào)IL-1β、IL-6、IL-6R、

2、TNF-α、MMP-9、ICAM-1、MCP-1和TGF-β的表達(dá)變化，從而探究腦缺血再灌注損傷模型中樞損傷局部及外周循環(huán)系統(tǒng)中炎癥反應(yīng)相關(guān)信號(hào)的表達(dá)情況。
　　 2)以IL-6基因敲除鼠及正常對(duì)照組C57BL/6小鼠為研究對(duì)象制備不同免疫狀態(tài)的免疫損傷模型，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)試驗(yàn)各組小鼠血清中免疫損傷相關(guān)信號(hào)IL-1β和TNF-α的表達(dá)情況，應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)各組小鼠神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)相關(guān)腦區(qū)LH、AA表達(dá)功能信號(hào)IL-1β

3、的表達(dá)情況，以研究IL-6/IL-6R信號(hào)傳導(dǎo)通路在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中的作用。
　　 研究結(jié)果:
　　 1)腦缺血再灌注損傷模型組大鼠與假手術(shù)組及空白組大鼠比較，中樞腦缺血損傷局部的炎癥損傷相關(guān)信號(hào)IL-6、IL-6R、IL-1β、TNF-α、MMP-9、ICAM-1、MCP-1、TGF-β表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，表現(xiàn)為功能活動(dòng)相關(guān)的增高表達(dá)，各指標(biāo)相關(guān)信號(hào)隨時(shí)間變化的趨勢(shì)基本相似，呈經(jīng)典的雙峰形模式，12h～

4、48h達(dá)到其表達(dá)量的第1個(gè)峰值，72h～144h達(dá)到其表達(dá)量的第2個(gè)峰值;
　　 2)腦缺血再灌注損傷模型組大鼠與假手術(shù)組及空白組大鼠比較，外周血中的炎癥損傷相關(guān)信號(hào)IL-6、IL-6R、L-1β和HSP70表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，表現(xiàn)為功能活動(dòng)相關(guān)增高變化，各指標(biāo)相關(guān)信號(hào)隨時(shí)間變化的趨勢(shì)與中樞炎癥損傷信號(hào)基本相似;
　　 3)不同免疫狀態(tài)IL-6基因敲除小鼠神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)腦區(qū)LH、AA腦區(qū)，IL-1β的

5、表達(dá)水平明顯低于正常對(duì)照組C57BL/6小鼠，免疫4天組及6天組的降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　 4)在基礎(chǔ)狀態(tài)下，IL-6基因敲除鼠中樞神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)腦區(qū)LH、AA腦區(qū)，以及外周血中IL-1β表達(dá)水平均低于正常對(duì)照組C57BL/6小鼠，且其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　 5)不同免疫狀態(tài)IL-6基因敲除小鼠外周血中炎癥損傷相關(guān)信號(hào)TNF-α(一)過性高于正常對(duì)照組C57BL/6小鼠，在免疫兩天組實(shí)驗(yàn)結(jié)

6、果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，后表達(dá)水平下降未表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 研究結(jié)論:
　　 1)在腦缺血再灌注損傷情況下，中樞損傷腦區(qū)局部及外周血中炎癥損傷和損傷修復(fù)信號(hào)分子均呈功能相關(guān)的活化狀態(tài)，表明細(xì)胞因子參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部的損傷及損傷修復(fù)過程和全身的網(wǎng)絡(luò)功能調(diào)節(jié)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，細(xì)胞因子通過神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)調(diào)控?fù)p傷局部及全身的應(yīng)答反應(yīng)。
　　 2)不同免疫狀態(tài)