急性髓系白血病酪氨酸激酶突變與NPM1基因突變的研究.pdf

1、目的：本研究探討急性髓系白血病(AML)患者中FMS樣酪氨酸激酶3(FLT3)、c-KIT、Janus激酶2(JAK2)、核仁磷酸蛋白1(NPM1)基因突變發(fā)生情況，并了解其臨床特征及預(yù)后。
　　方法：1.應(yīng)用R顯帶技術(shù)對129例初發(fā)及6例復(fù)發(fā)AML患者進(jìn)行核型分析，并對未檢出異常核型或伴有t(15;17)、t(8;21)、inv(16)的標(biāo)本采用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)和PML-RARa、AML1/ETO、CBFB/MYHI

2、I融合基因探針進(jìn)行驗(yàn)證。2.采用基因組DNA-PCR及等位基因特異性PCR(Allele-specific PCR AS-PCR)方法分別檢測135例AML患者FLT3、NPM1、JAK2基因突變情況，PCR結(jié)合序列測定分析FLT3基因內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)(ITD)突變及JAK2突變，PCR結(jié)合限制性內(nèi)切酶酶切及序列測定分析FLT3基因第二酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域(TKD)點(diǎn)突變及直接測序法檢測AML患者NPM1基因第12外顯子的突變情況。3.采用基因

3、組DNA-PCR方法及直接測序法檢測其中43例預(yù)后良好核型組AML患者c-KIT的突變情況。
　　結(jié)果：1.在135例進(jìn)行核型檢測的AML患者中20例無分裂相，66例正常核型，49例存在異常核型。2.129例初發(fā)AML患者中共檢出FLT3突變20例(15.5％)，其中ITD陽性16例(12.4％)，TKD陽性5例(3.9％)，1例(0.8％)患者同時(shí)發(fā)生FLT3-ITD和TKD兩種突變，6例復(fù)發(fā)患者中未見FLT3突變;129例初發(fā)

4、患者中NPM1突變24例(18.6％)，6例復(fù)發(fā)患者中NPM1突變1例(16.7％)，其中5例合并有FLT3-ITD突變;135例AML患者中未見JAK-2突變。3.43例預(yù)后良好核型組AML患者中共檢測出c-KIT突變4例(9.3％)，其中1例同時(shí)合并FLT3-ITD突變。4.FLT3-ITD突變在66例正常核型中的發(fā)生率15.2％(10/66)高于異常核型6.1％(3/49)，兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）;NPM1突變在66例染

5、色體正常核型中的發(fā)生率28.8％(19/66)，顯著高于異常核型2.0％(1/49)(P＜0.01)。5.NPM1突變與FLT3-ITD相關(guān)，正常核型NPM1陽性患者FLT3-ITD檢出率26.3％(5/19)高于NPM1陰性患者10.6％(5/47)(P＞0.05)。6.單純FLT3-ITD突變及合并NPM1基因突變患者骨髓原始細(xì)胞比例、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)均高于野生型患者，c-KIT突變可在CBF-AML發(fā)生，可見較高的復(fù)發(fā)率，而在M3

6、中未見。FLT3-ITD突變AML患者預(yù)后較差，F(xiàn)LT3-TKD點(diǎn)突變對預(yù)后的影響不明顯，NPM1基因突變患者具有較高的臨床完全緩解率(clinical complete remission CR)。
　　結(jié)論：FLT3基因和NPM1基因突變是AML尤其是正常核型AML患者常見的分子學(xué)異常，F(xiàn)LT3-TKD點(diǎn)突變對預(yù)后的影響不明顯，c-KIT主要與t(8;21) AML具有相關(guān)性，可能提示較高復(fù)發(fā)率，預(yù)后不良，JAK-2突變在原發(fā)