Ⅲ型受體酪氨酸激酶與急性白血病的關(guān)系及臨床意義.pdf

1、我們擬應(yīng)用攜帶-c-KIT突變的Kasumi-i細(xì)胞系體外研究伊馬替尼對(duì)白血病細(xì)胞生物學(xué)的影響,為伊馬替尼應(yīng)用到c-KIT過(guò)表達(dá)或突變的AML患者提供臨床前實(shí)驗(yàn)依據(jù).1.FLT3基因激活突變與急性白血病的關(guān)系及臨床意義PCR方法分別擴(kuò)增FLT3基因第14、1 5外顯子(ITD所在區(qū)域)和第20外顯子(點(diǎn)突變所在區(qū)域).前者PCR產(chǎn)物在3%瓊脂糖凝膠電泳上,出現(xiàn)額外體積大于野生型FLT3的條帶即為ITD陽(yáng)性產(chǎn)物;后者PCR產(chǎn)物經(jīng)EcoRV

2、內(nèi)切酶充分消化后,不能被切開(kāi)的樣本即存在點(diǎn)突變.部分陽(yáng)性樣本進(jìn)行測(cè)序,分析其臨床相關(guān)性.2.酪氨酸激酶抑制劑伊馬替尼對(duì)Kasumi-1細(xì)胞增殖與凋亡的影響我們進(jìn)一步應(yīng)用MTT比色法觀察伊馬替尼對(duì)Kasumi-1細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期和檢測(cè)髓系分化抗原的表達(dá),Annexin V標(biāo)記、DNA凝膠電泳分析細(xì)胞凋亡.結(jié)果顯示,伊馬替尼抑制Kasumi-1細(xì)胞生長(zhǎng),使細(xì)胞阻滯于G0/G1期,誘導(dǎo)髓系分化抗原CD11b、CD13