FLT3-ITD基因突變急性髓系白血病的臨床及實驗室特征分析.pdf

1、背景：
　　急性髓系白血?。╝cute myeloid leukemia，AML）是一類具有高度異質(zhì)性的造血系統(tǒng)惡性克隆性疾病，目前對于AML的診斷需要綜合形態(tài)學、免疫學、細胞遺傳學和分子生物學等方面，全面而完整的實驗室資料有助于更好的評估AML的預后及指導治療。隨著對 AML分子生物學特性研究的深入，研究者發(fā)現(xiàn)AML患者在基因水平上存在高度異質(zhì)性，一系列與AML預后相關的異?；虮磉_及突變相繼被發(fā)現(xiàn)。Ⅲ型受體酪氨酸激酶家族成員F

2、MS樣酪氨酸激酶3（fms like tyrosine kinase3，F(xiàn)LT3）基因就是所發(fā)現(xiàn)的AML最常見的不良預后基因之一。FLT3基因的異常表達及突變對 AML的發(fā)生、發(fā)展及預后起到重要作用，F(xiàn)LT3基因內(nèi)部串聯(lián)重復突變（internal tandem duplication，ITD）是FLT3基因最為常見的一種突變形式，在AML中的突變率約為13~31％。FLT3-ITD突變的AML患者通常具有外周血白細胞計數(shù)高、骨髓原始細胞

3、比例高、誘導化療緩解率低、復發(fā)率高及生存期短等特征。
　　目的：
　　分析FLT3-ITD突變在AML中的發(fā)生情況及其與AML患者臨床及實驗室特征、療效及預后評估的相關性。
　　研究對象和方法：
　　收集鄭州大學第一附屬醫(yī)院血液內(nèi)科2012年10月至2014年12月初診的347例 AML患者，根據(jù) FLT3-ITD突變檢測結果將 AML患者分為FLT3-ITDm+AML組及 FLT3-ITDm-AML組。應用 P

4、CR聯(lián)合DNA測序法進行FLT3-ITD突變的檢測；骨髓液涂片進行瑞氏及組織化學染色，顯微鏡下觀察骨髓細胞形態(tài)及幼稚細胞所占比例；流式細胞術檢測白血病細胞的免疫表型特征，分別計算陽性細胞數(shù)及抗原陽性率；應用骨髓24小時培養(yǎng)法及G顯帶技術檢測染色體核型，根據(jù)核型表現(xiàn)分為預后良好、中等及不良核型組。全部病例均按FAB標準及 WHO標準確診，接受誘導緩解治療，并序貫以緩解后治療。所有患者隨訪至2015年1月31日或患者死亡日期，應用SPSS軟

5、件分析患者的無事件生存率（EFS）及總生存率（OS）。
　　結果：
　　1. FLT3-ITDm+AML的臨床特征：FLT3-ITD突變在 AML中的發(fā)生率為17.3%。60例FLT3-ITDm+AML與287例FLT3-ITDm-AML在患者性別比例及發(fā)病年齡上無統(tǒng)計學差別。與FLT3-ITDm-AML患者相比，F(xiàn)LT3-ITDm+AML患者外周血WBC計數(shù)及骨髓原始細胞比例顯著增高（P＜0.05）。
　　2. FL

6、T3-ITDm+AML的免疫表型特征：在所檢測的22個抗原中，兩組共有9個抗原在白血病細胞抗原陽性細胞數(shù)上存在統(tǒng)計學差別，在FLT3-ITDm+AML組表達顯著高于在 FLT3-ITDm-AML組表達的抗原為 CD33、CD11b、CD4和CD7；在FLT3-ITDm+AML組表達顯著低于在FLT3-ITDm-AML組表達的抗原為CD16、CD15、CD56、CD117和CD34（P＜0.05）。兩組共有7個抗原在白血病細胞抗原陽性率上

7、存在統(tǒng)計學差別，CD33、CD4和 CD7在 FLT3-ITDm+AML組的陽性率顯著高于在FLT3-ITDm-AML組；CD16、CD15、CD117和CD34在FLT3-ITDm+AML組的陽性率顯著低于在FLT3-ITDm-AML組（P＜0.05）。
　　3. FLT3-ITDm+AML的形態(tài)學分布：按FAB分型，60例FLT3-ITDm+AML患者中 AML-M2占22例（36.7%）， AML-M5占31例（51.7%）

8、；287例FLT3-ITDm-AML患者中 AML-M2占163例（56.8%）， AML-M5占76例（26.5%）。FLT3-ITDm+AML患者中AML-M5亞型的構成比高于其它亞型。
　　4. FLT3-ITDm+AML的細胞遺傳學特征：73.1%的FLT3-ITDm+AML為正常染色體核型，F(xiàn)LT3-ITDm+AML預后良好核型比例顯著低于 FLT3-ITDm-AML（7.7%vs20.3%；χ2=4.163，P=0.0

9、41）。
　　5.治療反應：FLT3-ITDm+AML組第1療程誘導化療CR率較FLT3-ITDm-AML組顯著降低（39.6%vs69.6%；χ2=17.132，P=0.000）。FLT3-ITDm+AML與FLT3-ITDm-AML的中位隨訪時間分別為5.6（0.07~25.1）月和7.3（0.03~28.4）月。與FLT3-ITDm-AML組相比，F(xiàn)LT3-ITDm+AML組1年EFS率（33.1% vs66.4%；Z=-3

10、.021，P=0.001）及1年OS率（41.8%vs70.6%；Z=-2.876，P=0.002）顯著降低。
　　6. FLT3-ITD突變與 NPM1突變的關聯(lián)性：在合并 NPM1突變率上， FLT3-ITDm+AML較FLT3-ITDm-AML顯著增高（44.6%vs14.8%；χ2=24.826， P=0.000）。FLT3-ITDm+/NPM1m+AML患者發(fā)病年齡及年齡≥60歲患者比例較FLT3-ITDm+/NPM1m

11、-AML顯著增高（P＜0.05）。FLT3-ITDm+/NPM1m+AML與FLT3-ITDm+/NPM1m-AML的中位隨訪時間分別為4.7（0.07~22.1）月和6.1（1.3~25.1）月。FLT3-ITDm+/NPM1m+AML組與FLT3-ITDm+/NPM1m-AML組1年EFS率（36.7%vs27.3%；Z=-1.233，P=0.109）及1年OS率（38.9%vs42.7%；Z=-0.923，P=0.176）差別無統(tǒng)

12、計學意義。
　　結論：
　　1. FLT3-ITDm+AML患者外周血WBC計數(shù)及骨髓原始細胞比例高，伴特征性白血病細胞表面抗原異常表達，誘導化療CR率及1年OS率低，提示FLT3-ITD突變是AML患者的不良預后因素。
　　2. FLT3-ITDm+AML主要見于正常染色體核型，在 AML-M5亞型中發(fā)生率高。
　　3. FLT3-ITDm+AML合并NPM1突變率高，F(xiàn)LT3-ITDm+/NPM1m+AML患