血漿游離DNA檢測FLT3-ITD突變及ITD特征對急性髓細(xì)胞白血病個(gè)體化診斷的意義.pdf

1、目的:探討血漿游離DNA FLT3基因中內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)序列(internal tandemduplication，ITD)突變及ITD特征，為急性髓細(xì)胞白血?。╝cute myelocytic leukemia，AML）無創(chuàng)性診斷、個(gè)體化的分子靶向治療和療效監(jiān)視提供新的策略。
　　方法:1.提取88例初診AML患者和40例對照者（20例健康體檢者及20例良性血液病患者）血漿游離DNA及骨髓細(xì)胞DNA，以PCR擴(kuò)增出管家基因globi

2、n作為DNA提取成功的判定標(biāo)準(zhǔn)，核酸濃度測量儀測量88例初診AML患者和40例對照者血漿游離DNA濃度，并進(jìn)行比較;2.采用PCR方法同步平行檢測88例初診AML患者血漿游離DNA和骨髓細(xì)胞DNA中FLT3-ITD基因突變，產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后，在凝膠成像分析儀上觀察結(jié)果，并將檢測結(jié)果進(jìn)行比較。3.毛細(xì)管電泳法同步平行檢測FLT3-ITD陽性患者血漿游離DNA和骨髓細(xì)胞DNA中的ITD數(shù)量，并將檢測結(jié)果進(jìn)行比較。
　　結(jié)果:1.

3、88例初診AML患者血漿游離DNA濃度明顯高于20例健康體檢者及20例良性血液病患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);健康體檢者與良性血液病患者間、FAB分型不同的初診AML患者間的血漿游離DNA濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。2.88例初診AML患者中發(fā)生FLT3-ITD突變18例(20.5％，18/88)，該結(jié)果與骨髓細(xì)胞DNA檢測結(jié)果完全一致。3.18例FLT3-ITD陽性患者血漿游離DNA的PCR產(chǎn)物經(jīng)毛細(xì)管電泳后結(jié)果顯

4、示，13例(72.22％，13/18)患者出現(xiàn)一條ITD條帶峰，其骨髓細(xì)胞DNA結(jié)果與血漿游離DNA結(jié)果一致;5例(27.78％，5/18)患者血漿出現(xiàn)多條ITD條帶峰，而骨髓細(xì)胞只有2例結(jié)果與其血漿結(jié)果一致，另外3例結(jié)果不具有一致性。
　　結(jié)論:1、初診AML患者血漿游離DNA濃度明顯高于健康人及良性血液病患者;2、初診AML患者血漿游離DNA中檢測白血病特異性的FLT3-ITD基因突變與直接檢測骨髓細(xì)胞DNA結(jié)果一致，提示在未

5、來可以通過檢測白血病患者血漿游離DNA中特異性的基因突變來診斷白血病，對白血病的無創(chuàng)性診斷、個(gè)體化治療和監(jiān)測預(yù)后有重要意義;3、18例FLT3-ITD陽性的患者毛細(xì)管電泳檢測血漿游離DNA中ITD數(shù)量，其中15例血漿游離DNA檢測結(jié)果與骨髓細(xì)胞DNA檢測結(jié)果一致，3例血漿游離DNA檢測結(jié)果出現(xiàn)多條ITD條帶峰而骨髓細(xì)胞DNA檢測結(jié)果并未出現(xiàn)，我們可以推測通過檢測FLT3-ITD陽性AML患者來源于白血病細(xì)胞的血漿游離DNA中ITD的數(shù)量