輸血對早產(chǎn)兒紅細胞NO生物活性及血流動力學的關系研究.pdf

1、本研究以貧血且接受輸血的早產(chǎn)兒為研究對象，探討輸血前后早產(chǎn)兒外周血RSNO變化，同時觀察環(huán)鳥甘單磷酸及ROS變化，以及對臨床預后轉歸的影響，對輸血的有效性及安全性進行探討，為制定可以的輸血策略，改良紅細胞保存方式提供依據(jù)。
　　 第一部分：輸血對早產(chǎn)兒紅細胞NO生物活性的影響
　　 目的：
　　 1.觀察輸血前后，早產(chǎn)兒動脈血亞硝基硫醇濃度的變化與NO代謝產(chǎn)物硝酸鹽及亞硝酸鹽的改變，了解輸血前后體內(nèi)NO儲存的變化

2、。
　　 2.觀察輸血對NO/cGMP通路的影響。
　　 3.通過檢測丙二醛及超氧化物歧化酶的變化來觀察探討輸血前后ROS的變化。
　　 方法：
　　 1.研究對象的選擇
　　 以首次入住我院NICU，胎齡<35周，住院期間接受輸血的早產(chǎn)兒30例為研究對象?；純河忻庖咝匀苎约膊?、先天性心臟病、其他重大出生缺陷導致需外科手術、染色體異常、有急性失血病史、因經(jīng)濟或其他原因中途放棄治療、轉入我院前在外

3、院治療有輸血病史及參加其他臨床研究可能對本研究結果有影響的早產(chǎn)兒不列入研究范圍。輸血量以15-20ml/kg于4-5小時內(nèi)輸入。
　　 2.血標本的采集
　　 對滿足入選標準的貧血早產(chǎn)兒，在輸血前4小時內(nèi)，輸血完成后2小時內(nèi)，輸血后24小時時收集動脈血標本，分別用肝素及乙二胺四乙酸抗凝，血標本采集30min內(nèi)離心，紅細胞內(nèi)加入紅細胞穩(wěn)定液，將血漿和紅細胞分別避光液氮保存。
　　 3.用納米金電化學法檢測貧血早產(chǎn)兒

4、輸血前4小時內(nèi)，輸血后2小時內(nèi)，輸血后24小時時動脈血血漿及紅細胞中RSNO的變化。用硝酸鹽還原酶法檢測輸血前4小時內(nèi)、輸血后2小時內(nèi)、24小時，貧血早產(chǎn)兒動脈血血漿NO3?與NO2?濃度的變化。硫代巴比妥法法檢測MDA，黃嘌呤氧化酶發(fā)檢測SOD活性，用酶聯(lián)免疫吸附反競爭法檢測cGMP，觀察輸血前4小時內(nèi)、輸血后2小時內(nèi)及輸血后24小時血漿內(nèi)的變化。
　　 結果：
　　 1.輸血后2小時內(nèi)血漿及紅細胞RSNO比輸血前顯著

5、下降（血漿：850.55±334.14pA vs1220.0±323.2pA,P<0.05；紅細胞：14.35±4.72 nA/mmo vs21.4±6.35nA/mmol，P<0.05）。輸血后2小時內(nèi)、24小時血漿內(nèi)NO3?與NO2?之和與輸血前4小時相比均有顯著下降（P<0.01）。
　　 輸血后24小時紅細胞內(nèi)RSNO為(19.34±5.77)nA/mmol，與輸血后2小時內(nèi)相比，有上升趨勢，但兩者無顯著性差異。與輸血前

6、水平略低，但差異無統(tǒng)計學意義。
　　 輸血后24小時RSNO水平在(918.73±321.58)pA，明顯低于輸血前水平，兩者差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。與輸血后2小時內(nèi)相比有上升趨勢，但兩者差異無統(tǒng)計學意義。
　　 2.cGMP變化：輸血前4小時內(nèi)血漿內(nèi)cGMP水平在(150.85±26.09)pmol/ml，輸血后2小時內(nèi)和24小時分別為(146.83±23.06)pmol/ml和(150.43±23.12)p

7、mol/ml，輸血前與輸血后相比無顯著性差異。
　　 3.MDA和SOD變化：
　　 輸血前血漿內(nèi)MDA水平在(5.66±2.87)nmol/ml，輸血后2小時內(nèi)升至(6.73±3.32)nmol/ml，與前者相比兩者有顯著性差異（P<0.05）。
　　 輸血后24小時血漿MDA水平在(6.50±3.83)nmol/ml，與輸血前相比平均水平雖有增加，但兩者差異無統(tǒng)計學意義。與輸血2小時相比兩者無顯著性差異

8、>　　 輸血前血漿內(nèi)SOD水平在(100.00±10.44)U/ml，輸血后2小時內(nèi)SOD下降至(92.81±10.11)U/ml，與前者相比，兩者有顯著性差異（P<0.05）。
　　 輸血后24小時血漿內(nèi)SOD水平逐漸上升至(99.42±12.87)U/ml，與輸血后2小時內(nèi)相比有顯著性差異（P<0.05)；與輸血前水平相當，無顯著性差異。
　　 結論：
　　 1.輸血后會引起血漿及紅細胞NO儲存迅速下降，但

9、可以隨著時間延長逐漸恢復到原來水平。
　　 2.輸血后NO/cGMP通路未明顯變化。提示NO儲備雖有減少，但NO/cGMP通路可能不受輸血影響。
　　 3.輸血會造成暫時性氧化應激損傷，輸血后2小時，血漿內(nèi)MDA升高，血漿總SOD活力下降，輸血后24小時均有不同程度的改善。
　　 第二部分：輸血對貧血早產(chǎn)兒臨床血流動力學變化
　　 目的：
　　 1.觀察輸血前后血壓、心率、脈搏等生命體征的變化

10、r>　　 2.觀察輸血前后氧合、呼吸機參數(shù)以及血乳酸的變化
　　 3.觀察輸血前后心輸出量的變化
　　 方法：
　　 1.研究對象的選擇
　　 以首次入住我院NICU，胎齡<35周，住院期間接受輸血的早產(chǎn)兒30例為研究對象。
　　 2.排除標準
　　 1)有明顯的感染癥象；
　　 2)病情嚴重，隨時有生命危險；
　　 3)有免疫性溶血性疾病；
　　 4)先天性心臟

11、病，包括動脈導管未閉者；
　　 5)其他重大出生缺陷導致需外科手術；
　　 6)染色體異常者或其他畸形；
　　 7)有急性失血；
　　 8)因經(jīng)濟或其他原因中途放棄治療者；
　　 9)患兒參加其他臨床研究可能對本研究結果有影響者。
　　 3.觀察指標
　　 輸血前及輸血后24小時內(nèi)血壓、呼吸、脈搏、體溫等生命體征的變化；觀察輸血前及輸血后24小時內(nèi)氧合、呼吸機參數(shù)以及乳酸變化等；觀

12、察10例輸血前及輸血后24小時心輸血量的變化。
　　 結果：
　　 1.觀察30例早產(chǎn)兒中，需機械輔助通氣10例，CPAP依賴3例，面罩或鼻導管吸氧10例，可自主呼吸不依賴氧氣7例。對其中10例早產(chǎn)兒觀察其輸血前后心輸血量的變化。
　　 2.輸血后24小時心率明顯下降，從原來的(150.63±10.87)次/分，下降至146.75±13.0次/分（P　　

13、3.輸血后24小時內(nèi)患兒氧合情況改善不明顯，呼吸機使用參數(shù)，乳酸均無顯著性變化。
　　 4.輸血前及輸血后24小時，心輸血量雖有下降趨勢，從輸血前的250.4±71.3ml/kg/min下降為輸血后的239.1±64.4ml/kg/min，但兩者相比無統(tǒng)計學意義。
　　 結論：
　　 1.輸血后心率明顯下降，但對其他血液動力學指標無明顯影響。
　　 2.輸血對早產(chǎn)兒氧合情況改善不明顯。
　　 第三

14、部分：不同輸血策略對貧血早產(chǎn)兒臨床預后的影響
　　 目的：
　　 1.通過回顧性研究比較限制性輸血組與非限制性輸血組的患兒院內(nèi)感染、住院天數(shù)、死亡率等一些臨床預后情況。
　　 方法：
　　 1.研究對象的選擇
　　 對2004年至2008年首次入住我院NICU，體重<1500g，住院時間超過2周且住院期間接受輸血的早產(chǎn)兒為研究對象。排除標準同實驗第一部分。最后入選130名例，其中限制性輸血組57例

15、，非限制性輸血組73例。
　　 2.分組標準
　　 限制性輸血組的各輸血閾值根據(jù)美國2008年早產(chǎn)兒輸血指南，非限制性輸血組則在限制性輸血閾值基礎上結合患兒的實際情況及目前國內(nèi)輸血策略適當提高Hct閾值。對于一般病情穩(wěn)定，不需要輔助通氣，限制性非限制性分別為Hct<21％和<30％；對于需要吸氧，頻發(fā)呼吸暫停需要氣囊復蘇，或心率>180次/min或呼吸>80次/min持續(xù)24h以上，或體重增加不理想(<10g/d)的患兒

16、，限制性輸血組要確保Hct>31％，非限制性組>38％；對于需要CPAP或機械輔助通氣的患兒，限制性輸血組和非限制性輸血組的輸血閾值Hct分別為36％和46％。
　　 3.觀察指標
　　 ①患兒的基本情況：包括患兒的胎齡，性別，出生體重，apgar評分，入院Hct，是否輔助通氣、多胎等。
　　 ②患兒的輸血情況：入院基礎Hct，輸血前Hct，輸血量，輸血次數(shù)，首次輸血時日齡。
　　 ③觀察指標：輸血前后血

17、壓、呼吸、脈搏、體溫等生命體征以及呼吸機的使用參數(shù)的變化等；住院天數(shù)，死亡率，院內(nèi)感染率，呼吸暫停次數(shù)及程度的變化，氨茶堿的使用，體重恢復，PDA是否重新開放，輸血反應等。
　　 結果：
　　 1.兩組患兒的基本情況相似，出生體重、孕周、Apgar評分，入院Hct均差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 2.限制性輸血組患兒接受輸血前的Hct為(29.7±5.56)％，要明顯低于非限制性輸血組患兒(36.5±6

18、.43)％（P<0.01）；限制性輸血患兒和非限制性輸血患兒每次接受輸血量相當(23.7±6.1 vs23.3±7.7，P>0.05)，接受輸血總量雖有增加（0.63±0.41 VS0.56±0.54)，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 3.非限制性輸血患者機械輔助通氣天數(shù)比限制性輸血組明顯減少(5.9±4.7 vs7.5±6.7，P<0.05)。在院內(nèi)感染、住院天數(shù)、死亡率、體重恢復、呼吸暫停次數(shù)及程度等方面兩種輸血