體外共培養(yǎng)雙份臍血CD34+細胞對各自歸巢和分化能力的影響.pdf_第1頁
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1、背景：臍血是良好的造血干細胞(haematopoietic stem cell，HSC)來源，但臍血中含有的HSC相對較少從而限制了其在成人中的應用。使用雙份臍血混合移植治療白血病獲得成功，激起人們對其相互作用機制的研究。研究證實，接受雙份臍血移植的患者，大部分長期造血僅來源于一份臍血，而另一份臍血在植入早期即被排斥，推測臍血與臍血間可能存在相互作用。 目的：本實驗將兩份臍血CD34+細胞體外混合培養(yǎng)通過觀察對彼此歸巢和分化能力

2、有無影響了解兩份臍血相互作用是否與CD34+細胞間的相互作用有關。 方法： 從正常人骨髓中分離擴增間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stemcells，MSC)，富集傳代，加速器照射(12Gy)后作為滋養(yǎng)層細胞，將免疫磁珠分選純化的兩份臍血CD34+細胞混合接種到其表面(其中一份用CFSE標記)，共培養(yǎng)6天，通過流式細胞術檢測兩份CD34+細胞表面歸巢相關分子(CD26，CD44，CD54，CD62L，CD162，C

3、D184)以及分化指標(CD33，CD41，CD71)的變化。 結果： 1.人骨髓MSC貼壁層的建立及鑒定體外培養(yǎng)12d左右，MSC融合達70％～80％，呈漩渦狀生長。細胞傳至第三代，其表面表達CD90、CD105、CD166、CD29、CD44、CD13和CD49e，不表達CD14、CD34、CD31、CD45和HLA-DR。 2.體外共培養(yǎng)后各份CD34+細胞的歸巢能力變化臍血CD34+細胞分選富集的純度為(

4、98.25±0.93)％，實驗組在共培養(yǎng)6天后，兩份臍血CD34+細胞的比例分別降為(60.44±6.32)％和(60.24±5.12)％，但與對照組比較無統(tǒng)計學差異；實驗組各份CD34+細胞的CD26，CD44， CD62L，以及CD184的陽性率較培養(yǎng)前均無顯著變化。而CD162表達顯著下降。CD54在培養(yǎng)3天后有所上升，但培養(yǎng)6天后下降至培養(yǎng)前水平，但與對照組比較無統(tǒng)計學差異。 3.體外共培養(yǎng)后各份CD34+細胞的分化能力

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