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文檔簡介
1、目的:探討從日本大耳白兔骨髓中分離CD34+細胞,并誘導(dǎo)、鑒定其分化為內(nèi)皮細胞的方法。
方法:采用Percoll分離液梯度離心繼以貼壁篩選法進行篩選分離,內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)誘導(dǎo)分化從骨髓中分離、培養(yǎng)的CD34+細胞,分別通過倒置顯微鏡、免疫細胞化學(xué)進行鑒定。
結(jié)果:對骨髓CD34+細胞進行細胞培養(yǎng)并繪制細胞生長曲線,可見細胞從第7天開始進入指數(shù)生長期,生長旺盛,細胞呈“S”型生長;CD34+細胞培養(yǎng)2周的細
2、胞覆蓋底部的瓶子,并達到高峰的增殖,細胞呈鵝卵石狀排列。凝血因子VIII,CD31免疫組化染色均為陽性;免疫熒光發(fā)現(xiàn)貼壁細胞呈現(xiàn)紅色熒光,提示細胞攝取Dil-AcLDL,證明CD34+細胞分化為有功能的內(nèi)皮細胞。
結(jié)論:
?。?)用Percoll分離液梯度離心繼以貼壁篩選法可分離出較多的CD34+細胞。
?。?)CD34+細胞培養(yǎng)、誘導(dǎo)2周細胞達增殖高峰。
?。?)CD34+細胞能夠分化為有功能的血管內(nèi)
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