人參皂苷Rg1對(duì)人臍血CD34+造血干細(xì)胞增殖分化及鈣敏感受體的影響.pdf

1、目的：觀察人參皂苷Rg1(ginscnosidesRg1,Rg1)對(duì)人臍血造血干細(xì)胞(humanumbilicalcordbloodhemopoieticstemcells,hUCB-HSCs)增殖、分化的影響,并初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法：密度梯度離心及免疫磁珠法分離hUCB-HSCs,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人細(xì)胞分化抗原。分組處理培養(yǎng)hUCB-HSCs,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及計(jì)數(shù)集落,RT-realtimePCR檢測(cè)細(xì)

2、胞CaSR(calcium-sensingreceptor)mRNA水平,免疫熒光染色觀測(cè)CaSR蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：磁式分選法分選所得hUCBCD34+HSCs細(xì)胞百分比為(81.57±12.95)％,集落生成單位檢測(cè)結(jié)果顯示,培養(yǎng)14d時(shí),與空白組相比,三氯化釓(Gadoliniumchloride,GdCl3)和Rg1各劑量組爆式紅系集落形成單位(burst-forminguniterythroid,BFU-E)、

3、粒-巨噬細(xì)胞集落形成單位(colonyformingunit-granulocytemacrophage,CFU-GM)、混合集落形成單位(colonyformingunit-granulocyte,erythrocyte,macrophage,megakaryocytz,CFU-GEMM)集落形成數(shù)目均明顯增高(P＜0.05),而二氯化鎘(cadmiumchloride,CdCl2)組BFU-E、CFU-GM和CFU-GEMM集落形成

4、數(shù)目均降低(P＜0.05)。hUCB-HSCs培養(yǎng)前6d,hUCB-HSCs增殖緩慢,10-14d細(xì)胞快速增殖數(shù)目達(dá)到最大,且與Rg1組相比,CdCl2+Rg1組細(xì)胞數(shù)顯著降低,但較單獨(dú)使用CdCl2組細(xì)胞數(shù)多。與空白組相比,及GdCl3和Rg1各劑量組之間相比,hUCB-HSC培養(yǎng)14d后,表達(dá)CD11b+、CD15+,CD71+、GA+和CD61+細(xì)胞百分率均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。hUCB-HSCs培養(yǎng)10d,Rg1、CdCl

5、2+Rg1組細(xì)胞CaSRmRNA表達(dá)水平均無(wú)顯著差異;MACS分選當(dāng)天(0d),CD34+hUCB-HSCs可見(jiàn)較強(qiáng)CaSR陽(yáng)性表達(dá)綠色熒光,培養(yǎng)至第10d,仍可見(jiàn)較強(qiáng)的CaSR陽(yáng)性表達(dá),與空白組比較,CdCl2、GdCl3、Rg1與Rg1+CdCl2各組之間熒光強(qiáng)度無(wú)顯著差異。
　　 結(jié)論：Rg1與CaSR激動(dòng)劑GdCl3均可產(chǎn)生明顯的促hUCBCD34+HSCs增殖效應(yīng),但不影響HSCs向造血多譜系細(xì)胞分化的能力;Rg1的促