單增李斯特菌inlAB天然缺失株的生物學特性及其主要毒力基因結構特征.pdf

1、單核細胞增多性李斯特菌（Listeria monocytogenes，簡稱單增李斯特菌）是引起人類李斯特菌?。╨isteriosis）的重要食源性病原菌。目前單增李斯特菌已經(jīng)受到世界各國衛(wèi)生部門和食品安全部門的高度重視，被世界衛(wèi)生組織列為四大食源性致病菌之一。
　　 本試驗分析了115株不同來源的單增李斯特菌，從中發(fā)現(xiàn)了一株天然缺失inlAB基因簇的非典型單增李斯特菌S10，隨后對該菌株展開了以下三方面的研究：
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2、1）S10的生物學特性分析及毒力基因的構成：對該菌株及其他7株不同血清型的菌株進行了生化分析、譜系及血清型分析、粘附力試驗、小鼠毒力試驗、感染相關基因分析和多位點序列分型。結果顯示菌株S10為具有典型生化特征的1/2b型單增李斯特菌，其粘附力顯著低于其他菌株，卻對小鼠具有一定的毒力。S10具有除inlAB外較完整的感染相關基因構成，位于譜系Ⅰ進化支的1/2b型與4b型分支間。
　　 （2）S10的inlAB鄰近區(qū)域生物信息學分析

3、：結果顯示，與其他血清型菌株inlAB鄰近區(qū)域結構相比，在inlAB兩翼具有獨特的基因結構。S10缺失lmo0431、lmo0432、lmo0435、lmo0436、lmo0437，僅擴增得到lmo00430，該基因與1/2a型菌株EGD、4b型菌株F2-365與4a型菌株HCC23的同源性分別為99.6％、94.0％與77.4％。
　　 （3）實時熒光定量PCR方法分析菌株S10的主要毒力基因表達水平的變化：利用實時熒光定量P

4、CR技術檢測了S10中內(nèi)化素基因（inlA，inlB，inlC，inlC2，inlD，inlE，inlJ）轉(zhuǎn)錄水平的差異。結果顯示，S10在天然缺失inlAB的前提下，inlC2，inlD，inlE的轉(zhuǎn)錄水平均極顯著高于參考菌株（p<0.01），而inlC，inlJ差異不顯著（p>0.05）.提示在inlAB缺失條件下，S10可能通過上調(diào)其他內(nèi)化素基因的轉(zhuǎn)錄水平，從而有效的代償其致病能力，進一步豐富了內(nèi)化素家族對細菌感染作用的認識.