單增李斯特菌表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測技術(shù)研究.pdf

1、單增李斯特菌可以經(jīng)過肉類、乳制品等引起細(xì)菌性食品中毒，是危害人類健康、威脅公共安全的重要病原體。因此及時發(fā)現(xiàn)食品中的污染病原菌十分重要，開發(fā)一種快速可靠的檢測食源性致病菌的方法已經(jīng)成為食品衛(wèi)生行業(yè)不可或缺的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。近幾年來，表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)因具有高效、快速、無損、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、化學(xué)、等領(lǐng)域。本文建立了一種拉曼光譜結(jié)合化學(xué)計量學(xué)分析快速檢測單增李斯特菌的方法。
　　本研究中首先對所有試驗菌株進(jìn)行16Sr

2、DNA測序驗證其正確性后，利用無監(jiān)督聚類分析研究了不同培養(yǎng)條件對李斯特菌拉曼光譜的影響。然后利用拉曼光譜結(jié)合無監(jiān)督和有監(jiān)督兩種判別分析方法對4種常見食源性致病菌:大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和單增李斯特菌進(jìn)行革蘭氏類型、屬水平和種水平區(qū)分。在此基礎(chǔ)上，通過人為接種6種李斯特菌于市售無菌牛奶中，對實際樣本中單增李斯特菌進(jìn)行檢測分析。此外，本研究中還利用拉曼光譜技術(shù)結(jié)合偏最小二乘回歸分析對混合菌中的單增李斯特菌進(jìn)行定量檢測。本研究結(jié)果

3、表明，不同培養(yǎng)條件對菌株表面分子組成造成的差異大于相同條件下不同菌株本身的差異;拉曼光譜能對4種常見食源性致病菌在革蘭氏類型、屬水平和種水平進(jìn)行正確區(qū)分，有監(jiān)督的距離判別分析和貝葉斯判別分析總體平均正確率分別為97.4％和98.8％;實際樣本檢測中，拉曼光譜能將單增李斯特菌與其他非致病李斯特菌正確區(qū)分開來，有監(jiān)督的判別分析平均識別率均在95％以上。本研究所建立的偏最小二乘回歸分析模型能夠定量檢測混合菌中的單增李斯特菌，經(jīng)過優(yōu)化選擇，交互