新生兒乙肝疫苗接種者成年期乙肝病毒的感染及抗病毒免疫應(yīng)答的研究.pdf

1、目前，慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染所導(dǎo)致的相關(guān)性疾病仍然是我國所面臨的主要健康問題之一。因江蘇啟東地區(qū)HBV感染的高流行率及肝癌的高發(fā)，在世界衛(wèi)生組織援助下和衛(wèi)生部支持下，我們于1983-1990年在本地區(qū)開展了新生兒乙肝疫苗免疫預(yù)防的大規(guī)模臨床試驗(yàn)，旨在預(yù)防和控制兒童和青少年的慢性HBV感染（研究中點(diǎn)）以及失代償性肝硬化和肝癌（研究終點(diǎn)）。目前，這些新生兒乙肝疫苗接種者已逐漸進(jìn)入成年期，其針對(duì)HB

2、V感染的免疫保護(hù)記憶力是否持續(xù)存在尚有待確定。我們選取了806例1985年出生，具有完整的持續(xù)性追蹤隨訪記錄，且2-5歲檢測(cè)時(shí)HBsAg（-）的新生兒乙肝疫苗接種者，于2009年在其達(dá)到24歲時(shí)抽樣404例，進(jìn)行了HBV感染標(biāo)志物的檢測(cè)。結(jié)果顯示,4例(1％)為HBsAg(+)，27例(6.7%)為HBsAg（-）anti-HBc(+)，121例(30.2%)為HBsAg（-）anti-HBs(＋)anti-HBc（-），252例(62

3、.4%)為HBsAg（-）anti-HBs（-）anti-HBc（-）。隨后，對(duì)招募到的141名HBsAg（-）anti-HBc（-）者進(jìn)行乙肝疫苗加強(qiáng)免疫注射測(cè)定，并于注射前、注射后10-12天，1個(gè)月及6個(gè)月后分別進(jìn)行anti-HBs測(cè)定。結(jié)果顯示，在103例24歲時(shí)血清anti-HBs（-）者中,5歲時(shí)anti-HBs(+)者（63例）在免疫后10-12天及1月后anti-HBs轉(zhuǎn)陽性率分別為71.4%(45/63)及87.3%(

4、55/63)，高于5歲時(shí)anti-HBs(-)者（40例）的轉(zhuǎn)陽性率，分別為57.5%(23/40)及80.0%(32/40)，但未發(fā)現(xiàn)兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在第二次加強(qiáng)免疫后，所有5歲時(shí)anti-HBs(+)者anti-HBs均＞500mIU/ml，而5歲時(shí)anti-HBs（-）者仍有6/40例anti-HBs＜10mIU/ml（平均幾何滴度為3.6，95%CT2.0-7.7）。按加強(qiáng)免疫前后anti-HBs水平變化，將上述141例疫苗接

5、種者分成三組，采用本實(shí)驗(yàn)室自行建立的ELISA方法檢測(cè)其血清中anti-HBs IgM，結(jié)果顯示，所有疫苗接種者血清中anti-HBsIgM均為陽性，三組間IgM水平未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在上述141例接受了乙肝疫苗加強(qiáng)免疫注射測(cè)定人群中隨機(jī)挑選44例疫苗接種者，在疫苗注射后10-12天獲取外周血單個(gè)核細(xì)胞，采用ELISPOT方法檢測(cè)其HBsAg特異性和HBeAg特異性的IFN-γ產(chǎn)生性T淋巴細(xì)胞。結(jié)果顯示，93.2%(41/44)可檢測(cè)

6、到HBsAg特異性T淋巴細(xì)胞，其中包括7/10例加強(qiáng)免疫10-12天后anti-HBs＜10mIU/ml者，88.6%(39/44)可檢測(cè)到HBeAg特異性T淋巴細(xì)胞。另外，我們對(duì)27例HBsAg（-）anti-HBc(+)疫苗接種者的血清樣品進(jìn)行HBV DNA定量，并采用巢式PCR對(duì)HBV S基因進(jìn)行擴(kuò)增，將PCR產(chǎn)物測(cè)序，對(duì)氨基酸序列進(jìn)行比對(duì)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，27例疫苗接種者中，19例血清中可檢測(cè)到HBV DNA，僅在1例中發(fā)現(xiàn)HBs

7、Ag的“a”決定基突變，有1例20歲時(shí)anti-HBc(+)在其24歲時(shí)HBsAg轉(zhuǎn)變?yōu)殛栃?。這一研究表明，早期年齡階段對(duì)乙肝疫苗免疫應(yīng)答良好的人群到達(dá)成年期后仍保持著抵抗HBV感染的免疫力，而早期對(duì)疫苗無應(yīng)答或低應(yīng)答者隨著年齡增長(zhǎng)可能面臨感染HBV的風(fēng)險(xiǎn)；新生兒乙肝疫苗接種者到達(dá)成年期后，無論血清中是否可以檢測(cè)到anti-HBs，仍保持對(duì)HBV感染的細(xì)胞免疫應(yīng)答；大部分單項(xiàng)anti-HBc(+)疫苗接種者體內(nèi)存在低拷貝病毒復(fù)制，且大多