茶皂素提取、純化及其抗菌活性的研究.pdf

1、本論文對(duì)茶皂素測(cè)定方法及從油茶餅粕中提取、純化茶皂素的工藝進(jìn)行了研究，并對(duì)茶皂素抗菌活性進(jìn)行了初步研究。 采用香草醛-濃硫酸顯色法對(duì)茶皂素含量的測(cè)定進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明：最大吸收波長(zhǎng)為520nm， 8％的香草醛無(wú)水乙醇溶液、4ml的77％濃硫酸用量、水浴溫度60℃、水浴時(shí)間20min 的條件下測(cè)定效果最佳，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.57％，平均回收率為99.26％，并通過(guò)干擾物質(zhì)排除試驗(yàn)得出，熱水浸提液中雜質(zhì)對(duì)顯色影響較大，而乙醇浸

2、提液中雜質(zhì)對(duì)顯色基本沒(méi)有影響，所以確定后續(xù)乙醇浸提液中的茶皂素含量測(cè)定采用該顯色方法。 油茶餅粕中茶皂素提取工藝的研究。通過(guò)對(duì)三種常見(jiàn)提取方法的比較，確定采用超聲波輔助的水提醇萃法提取茶皂素。采用響應(yīng)面分析方法優(yōu)化水提醇萃的超聲輔助提取條件。利用中心組合設(shè)計(jì)研究液固比、浸提溫度、超聲浸提時(shí)間、超聲功率四個(gè)自變量對(duì)響應(yīng)值茶皂素含量的影響。用SAS8.1 軟件進(jìn)行結(jié)果分析。響應(yīng)面的典型分析可知穩(wěn)定點(diǎn)是最大值。水提醇萃法提取茶皂素最佳

3、工藝條件為：液固比為4.1：1，浸提溫度為80℃，超聲浸提時(shí)間為3.3h，超聲功率為725W，85％乙醇萃取， 85％乙醇與濃縮液體積比4： 1，萃取溫度75℃，萃取時(shí)間2h，所得茶皂素含量達(dá)到80.51％。同時(shí)，本論文還探討了一種新的方法-水提發(fā)酵法提取茶皂素，并對(duì)影響其提取效果的因素進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明最佳提取條件為：液固比4： 1、浸提溫度80℃、浸提時(shí)間4.5h、酶a 添加量3‰、酶b 添加量3.5‰、酵母液與待發(fā)酵液體積比

4、1：10，并將水提發(fā)酵法與水提法、超聲輔助的水提醇萃法的提取效果進(jìn)行了比較，得出水提發(fā)酵法較水提法所得茶皂素含量有很大幅度的提高，得率相差不大；與超聲波輔助的水提醇萃法相比所得茶皂素的含量略低，得率有所提高，但所得產(chǎn)品品質(zhì)還有待提高。 采用大孔樹(shù)脂對(duì)乙醇浸提的茶皂素進(jìn)行進(jìn)一步的純化。通過(guò)對(duì)七種樹(shù)脂的篩選，確定選擇AB-8 樹(shù)脂進(jìn)行純化。研究各因素對(duì)AB-8 樹(shù)脂吸附、解吸效果的影響，得出AB-8 純化茶皂素的較佳吸附條件：上樣液

5、中茶皂素濃度34.4mg/ml、吸附溫度25℃、吸附時(shí)間100min；較佳脫附條件：脫附溫度30℃、洗脫液乙醇濃度80％、洗脫液與上樣液體積比4： 1、脫附時(shí)間80min，在此條件下茶皂素的吸附率90.70％、總洗脫率85.47％，茶皂素含量85％。 大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌是食品生產(chǎn)、加工、貯藏中常見(jiàn)的腐敗菌種，通過(guò)茶皂素對(duì)這三個(gè)菌種抑制效果的研究，得出茶皂素對(duì)大腸桿菌和枯草芽孢桿菌具有較好的抑制效果，對(duì)金黃色葡