茶皂素的提取純化工藝及其對(duì)乙醇脫氫酶活性影響的研究.pdf

1、我國是茶油產(chǎn)量的大國，每年產(chǎn)生大量油茶餅粕，餅粕中含有多種生物活性物質(zhì)，具有較高的利用價(jià)值，其中茶皂素含量約為10％～18％，開展條皂素的提取純化工藝及活性研究具有重要的意義。本文旨在得到具有一定解酒活性（對(duì)乙醇脫氫酶有激活作用）的茶皂素，并同時(shí)優(yōu)化提取純化的工藝參數(shù)。利用去離子水將茶皂素從油茶餅粕中浸提出來，參照香草醛-濃硫酸法對(duì)獲得的茶皂素產(chǎn)品進(jìn)行檢測，使用兩級(jí)沉淀法（即乙醇沉淀純化法和CaO沉淀純化法相結(jié)合的方法），對(duì)茶皂素粗提液

2、進(jìn)一步純化，獲得較高純度的茶皂素產(chǎn)品，并對(duì)其進(jìn)行紅外光譜表征。并與丙酮純化得到的茶皂素進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)采用兩級(jí)沉淀法得到的茶皂素對(duì)乙醇脫氫酶(ADH)具有較好的激活效果。主要結(jié)論如下:
　　1.先采用去離子水將油茶餅粕中的茶皂素提取出來，通過單因素及正交試驗(yàn)得到較佳的水提工藝為:水提溫度80℃，提取時(shí)間2h，料液比1∶12，提取三次。在此條件下，茶皂素的得率為13.88％。
　　2.以產(chǎn)品純度為考察指標(biāo)，建立了茶皂素兩級(jí)沉淀工

3、藝。在獲得高純茶皂素（純度＞87％）的同時(shí)，兼得粗油茶多糖。工藝所得茶皂素產(chǎn)品純度高，對(duì)乙醇脫氫酶有激活效果，綠色環(huán)保，實(shí)現(xiàn)了對(duì)油茶餅粕的資源利用。具體包括:
　　1)乙醇沉淀純化工藝:以茶皂素純度作為考察指標(biāo)，對(duì)乙醇濃度、沉淀反應(yīng)時(shí)間、濃縮液與乙醇體積比進(jìn)行單因素及正交優(yōu)化，確定了較佳醇沉工二藝為:95％乙醇，沉淀反應(yīng)時(shí)間1.5h，濃縮液與乙醇比1∶4，在此條件下，獲得的茶皂素純度為58.98％，（這一步各因素對(duì)得率的影響較?。?/p>

4、在水提的基礎(chǔ)上對(duì)茶皂素的純度有一定的提高。并在這一步得到油茶多糖粗提物。
　　2)氧化鈣沉淀法純化工藝:以茶皂素純度作為考察指標(biāo)，考察了沉淀劑、沉淀劑添加量、沉淀反應(yīng)時(shí)間、碳酸氫銨添加量、轉(zhuǎn)化時(shí)間、茶皂素沉淀轉(zhuǎn)化的次數(shù)，這些因素對(duì)茶皂素純度的影響，并得到了較佳的氧化鈣沉淀工藝條件，茶皂素得率最高在10.28％，并得到純度為87.58％茶皂素產(chǎn)品。
　　3.對(duì)獲得的茶皂素產(chǎn)品進(jìn)行了紅外光譜表征。分別考察丙酮純化法與兩級(jí)沉淀法獲