伊馬替尼治療后慢性髓細(xì)胞白血病患者耐藥基因分析及伊馬替尼血藥濃度檢測(cè)臨床相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討甲磺酸伊馬替尼（格列衛(wèi)，IM）治療的慢性粒細(xì)胞性白血?。–ML）耐藥患者ABL激酶區(qū)點(diǎn)突變發(fā)生情況及在患者并發(fā)耐藥中的意義；探討伊馬替尼血藥濃度檢測(cè)在指導(dǎo)CML治療中的意義。
　　 方法：1、應(yīng)用巢式RT-PCR對(duì)28例伊馬替尼治療效果欠佳及10例初診慢性期CML患者不同時(shí)期的51份骨髓標(biāo)本進(jìn)行ABL激酶區(qū)擴(kuò)增，對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行純化、測(cè)序以及序列同源性比對(duì)，確定點(diǎn)突變的存在及類型。2、利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS/M

2、S）對(duì)153例正規(guī)服用伊馬替尼治療CML患者進(jìn)行伊馬替尼血漿濃度檢測(cè)，分析血藥濃度與患者一般特征及療效等之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：1、38例患者共12例患者檢出點(diǎn)突變（31.6％），分別為M351T 2例，Q252H 7例，E279K 2例，E255V及E356G各1例；慢性期、加速期和急變期的突變發(fā)生率分別為17.6％（3/17）、41.7％（5/12）和44.4％（4/9）；血液學(xué)和遺傳學(xué)耐藥患者的突變發(fā)生率分別為50％（5

3、/10）和44.4％（8/18），95％可信區(qū)間分別為12.3％-87.7％和19％-69.9％；發(fā)現(xiàn)點(diǎn)突變的12例患者療效均欠佳，經(jīng)過加量至600mg，隨訪3-24個(gè)月，均在治療過程中出現(xiàn)疾病進(jìn)展或死亡。2、伊馬替尼血藥濃度水平與患者性別（t=0.9988，P>0.05）、年齡（r=-0.09687）、身高（r=-0.0663）、體重（r=-0.1881）、體表面積（r=-0.1427）以及服用IM時(shí)間（r=0.0023）之間無顯著相

4、關(guān)性。3、111例標(biāo)準(zhǔn)劑量伊馬替尼治療CML患者中86例獲得完全細(xì)胞遺傳學(xué)緩解（CCyR），在Q1、Q2-3和Q4組分別為18例（67.7％,18/27）、50例（87.7％,50/57）和18例（67.7％,18/27），三組間χ2=7.04，P<0.05；86例獲得CCyR患者的血漿谷濃度水平[（1643.45±594.10）ng/ml]高于25例未獲得CCyR的患者血漿谷濃度水平[（830.48±117.35）ng/ml]（P<0

5、.05，t=6.78）；106例進(jìn)行分子生物學(xué)評(píng)估的患者中，63例獲得分子生物學(xué)緩解（MMR），IM血漿谷濃度水平[（1671.3±349.38）ng/ml]高于未獲得MMR的43例患者IM血漿谷濃度水平[（925.49±147.47）ng/ml] (t=13.202，P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、ABL激酶區(qū)點(diǎn)突變是伊馬替尼治療CML失敗的重要原因之一。發(fā)生伊馬替尼耐藥的患者BCR/ABL基因ABL激酶區(qū)存

6、在高頻率的點(diǎn)突變，定期監(jiān)測(cè)ABL激酶區(qū)點(diǎn)突變有助于早期采取干預(yù)措施，提高治療水平，對(duì)避免喪失治療時(shí)機(jī)具有重要意義。
　　 2、加速、急變期CML患者突變檢出率較高，出現(xiàn)突變提示預(yù)后不佳，應(yīng)縮短觀察時(shí)間，及時(shí)調(diào)整治療方案；晚慢性期患者突變檢出率高于標(biāo)準(zhǔn)慢性期患者，應(yīng)定期進(jìn)行基因突變檢測(cè)并密切觀察患者病情變化以便能及早采取措施進(jìn)行干預(yù)。
　　 3、伊馬替尼血藥濃度水平與患者性別、年齡、身高、體重、體表面積等一般特征無關(guān)。

7、r>　　 4、服用400mg標(biāo)準(zhǔn)劑量進(jìn)行治療的慢性期CML患者中，Q2-3組患者中獲得CCyR患者例數(shù)明顯多于Q1及Q4組，獲得CCyR患者IM血漿谷濃度水平均高于未獲得CCyR的患者，提示一定范圍內(nèi)較高的血藥濃度水平有助于提高CCyR率，取得更好治療效果，但過高的血藥濃度水平可能對(duì)患者治療產(chǎn)生不利影響。
　　 5、服用400mg標(biāo)準(zhǔn)劑量進(jìn)行治療的慢性期CML患者中，三組間分子生物學(xué)緩解率（MMR）無明顯差異，但獲得MMR患者