住院非腹瀉兒童攜帶艱難梭菌的流行病學(xué)特征.pdf

1、目的:艱難梭菌屬?lài)?yán)格厭氧菌，是醫(yī)院獲得性腹瀉的常見(jiàn)病原菌，其形成的特征性芽孢對(duì)外界環(huán)境的抵抗力強(qiáng)，在疾病的傳播中發(fā)揮著重要作用。進(jìn)入機(jī)體后可不引起臨床癥狀呈定植狀態(tài)，在兒童體內(nèi)有很高的定植率，國(guó)外對(duì)住院兒童艱難梭菌的攜帶情況已有相關(guān)研究，但國(guó)內(nèi)尚缺乏相關(guān)數(shù)據(jù)。且由于其培養(yǎng)條件苛刻，國(guó)內(nèi)只有少數(shù)實(shí)驗(yàn)室能夠?qū)ζ溥M(jìn)行培養(yǎng)，快速培養(yǎng)艱難梭菌的方法對(duì)于臨床實(shí)驗(yàn)室明確診斷艱難梭菌感染(ClostridiumdifficileinfectionCDI

2、)至關(guān)重要。由于無(wú)癥狀兒童在艱難梭菌的傳播中發(fā)揮著重要作用，因此了解本地區(qū)兒童攜帶菌株的相關(guān)特征，對(duì)于CDI的預(yù)防有重要意義。本研究擬建立一種適合臨床實(shí)驗(yàn)室使用的快速培養(yǎng)方法，并對(duì)石家莊地區(qū)住院非腹瀉兒童攜帶的艱難梭菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，了解艱難梭菌在兒童體內(nèi)的定植情況，同時(shí)與成人菌株進(jìn)行同源性分析，了解同型菌株在兒童與成人間的傳播情況。
　　 方法:對(duì)196份糞便標(biāo)本進(jìn)行改良快速肉湯孵育法（本實(shí)驗(yàn)室建立）、傳統(tǒng)富集芽孢培養(yǎng)法、乙醇直

3、接處理法、乙醇加?；悄懰徕c法的比較，通過(guò)陽(yáng)性率的比較找出最佳培養(yǎng)方法。并對(duì)2011年10月-2012年6月石家莊地區(qū)三所醫(yī)院中0-18歲住院非腹瀉兒童的601份便標(biāo)本進(jìn)行菌株篩選;用PCR的方法檢測(cè)其毒素基因及核糖體分型，分型結(jié)果用NtsysPC2.0軟件進(jìn)行分析;將兒童分離到的菌株與同地區(qū)成人CDI患者的菌株進(jìn)行比對(duì)，對(duì)同源性進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果:通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)我實(shí)驗(yàn)室建立的改良快速肉湯孵育法與其他3種培養(yǎng)方法的陽(yáng)性率無(wú)明顯差

4、別（38.3％，37.1％，35.2％，36.1％，P＞0.05）。用快速肉湯孵育法在601份兒童糞便標(biāo)本中共分離培養(yǎng)出艱難梭菌152株，總攜帶率為25.3％(152/601)，產(chǎn)毒株攜帶率為18.3％(110/601);2歲以下嬰兒與2-18歲兒童攜帶率分別為20.6％(81/394)、34.3％(71/207)，2歲以下嬰兒對(duì)產(chǎn)毒株的攜帶率較2-18歲兒童低(14.7％vs.25.1％，P＜0.05)。PCR核糖體分型共分為23個(gè)不

5、同的型別，其中六種PR型別的菌株占82.2％(125/152)。成人艱難梭菌相關(guān)性腹瀉（ClostridiumdifficiledifficileassociateddiarrheaCDAD）患者的12個(gè)型別除SⅩ、SⅪ（各1株）外，其余的10個(gè)型別在兒童中都有發(fā)現(xiàn);
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)室改良的快速肉湯孵育法適合臨床實(shí)驗(yàn)室操作，為臨床明確診斷CDI提供了極大的方便，可以作為一種經(jīng)濟(jì)有效的方法在臨床艱難梭菌培養(yǎng)中推廣。本地區(qū)住院非