GLUT9基因啟動子區(qū)痛風易感SNP位點功能的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：前期研究發(fā)現(xiàn)人葡萄糖轉運蛋白9(GLUT9)基因啟動子區(qū)SNP rs13124007位點G/C與中國漢族男性的痛風易感性顯著相關。本研究擬進一步開展功能研究探討該SNP是否通過影響GLUT9基因啟動子的活性，進而引起痛風發(fā)生。
　　方法：PCR擴增包含GLUT9基因啟動子區(qū)SNP rs13124007位點在內的DNA片段，構建野生型（pGL3-basic-GLUT9/G）和突變型（pGL3-basic-GLUT9/C）質粒，

2、將質粒瞬時轉染至293T細胞使其在細胞內表達，通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)研究 SNP rs13124007 G/C對GLUT9啟動子區(qū)激活能力的影響，通過凝膠遷移率（EMSA）實驗觀察兩種等位基因型探針轉錄因子結合情況。
　　結果：重組質粒經(jīng)測序鑒定，證明目的片段已成功插入，且序列方向正確，重組質粒構建成功。雙熒光素酶報告系統(tǒng)顯示pGL3-basic-GLUT9/C較pGL3-basic-GLUT9/G對啟動子激活能力下降(P?0.0

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