貴州漢族、苗族、布依族人群載脂蛋白M基因啟動(dòng)子區(qū)三個(gè)位點(diǎn)SNP與血脂相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討載脂蛋白M（apo M）基因啟動(dòng)子區(qū)三個(gè)位點(diǎn)多態(tài)性是否在貴州不同民族之間存在差異，apo M基因多態(tài)性是否影響 apo M轉(zhuǎn)錄活性和表達(dá)水平，apo M啟動(dòng)子區(qū)不同的SNPs對(duì)血脂水平所產(chǎn)生的影響
　　方法：奧林巴斯AU5400全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清甘油三酯(TG),膽固醇（TC），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）；應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR-RFLP）對(duì)150例貴

2、州健康漢族，140例貴州健康苗族，140例貴州健康布依族人群血標(biāo)本 apo M啟動(dòng)子區(qū)域C-1065A,T-855C,T-778C進(jìn)行基因多態(tài)性分析，選取不同的SNPs DNA片段插入PMD-19T載體測(cè)序正確后插入PGL3-basic載體，構(gòu)建目的DNA-PGL3-basic載體，轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，用熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定其熒光值。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒測(cè)定血清apo M。
　　結(jié)果：
　?。?）三個(gè)民族

3、間T-855C的基因型和等位基因頻率無明顯差異；在C-1065A位點(diǎn)，苗族人群的A等位基因頻率明顯高于漢族（苗族人群:漢族人群=38.9％:30%，p=0.024）和布依族人群（苗族人群:布依族人群=38.9%:28.9%，p=0.012），而漢族與布依族之間無明顯差異；在T-778C位點(diǎn)，漢族人群C等位基因頻率明顯高于苗族（漢族人群:苗族人群=12%:5.4%，p=0.005）和布依族人群（漢族人群:布依族族人群=12%:5.4%，p

4、=0.005），而苗族與布依族之間未見差異。同時(shí)發(fā)現(xiàn)三個(gè)位點(diǎn)不存在完全的連鎖不平衡，單倍體型分析顯示漢族的CTC型頻率高于苗族與布依族，苗族的ATT型頻率高于漢族與布依族。
　?。?）以三個(gè)位點(diǎn)均未突變?yōu)閷?duì)照(-1065CC,-855TT,-778TT)，熒光活性顯示apo M T-778C位點(diǎn)CC型轉(zhuǎn)錄活性明顯低于對(duì)照;對(duì)apo M的表達(dá)水平分析發(fā)現(xiàn)單倍體CTC型apo M水平明顯低于其他基因型，T-778C位點(diǎn)CT+CC型ap

5、o M水平明顯低于TT型。
　　（3） apo M與血脂相關(guān)分析顯示apo M與HDL-C正相關(guān),血脂比較發(fā)現(xiàn)單倍體CTC型HDL-C明顯低于其他基因型；T-778C位點(diǎn)CT+CC型HDL-C水平明顯低于TT型。
　?。?）三個(gè)民族組間apo M和血脂比較發(fā)現(xiàn)漢族TC明顯高于苗族和布依族人群。
　　結(jié)論：apo M基因啟動(dòng)子區(qū)C-1065A和T-778C位點(diǎn)存在民族差異,貴州漢族人群apo M-778位點(diǎn)C等位基因遺傳