貴州漢族、苗族、布依族人群載脂蛋白M基因啟動子區(qū)三個位點SNP與血脂相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討載脂蛋白M（apo M）基因啟動子區(qū)三個位點多態(tài)性是否在貴州不同民族之間存在差異，apo M基因多態(tài)性是否影響 apo M轉(zhuǎn)錄活性和表達水平，apo M啟動子區(qū)不同的SNPs對血脂水平所產(chǎn)生的影響
　　方法：奧林巴斯AU5400全自動生化分析儀測定血清甘油三酯(TG),膽固醇（TC），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）；應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）對150例貴

2、州健康漢族，140例貴州健康苗族，140例貴州健康布依族人群血標(biāo)本 apo M啟動子區(qū)域C-1065A,T-855C,T-778C進行基因多態(tài)性分析，選取不同的SNPs DNA片段插入PMD-19T載體測序正確后插入PGL3-basic載體，構(gòu)建目的DNA-PGL3-basic載體，轉(zhuǎn)染HepG2細胞，用熒光素酶報告基因測定其熒光值。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒測定血清apo M。
　　結(jié)果：
　?。?）三個民族

3、間T-855C的基因型和等位基因頻率無明顯差異；在C-1065A位點，苗族人群的A等位基因頻率明顯高于漢族（苗族人群:漢族人群=38.9％:30%，p=0.024）和布依族人群（苗族人群:布依族人群=38.9%:28.9%，p=0.012），而漢族與布依族之間無明顯差異；在T-778C位點，漢族人群C等位基因頻率明顯高于苗族（漢族人群:苗族人群=12%:5.4%，p=0.005）和布依族人群（漢族人群:布依族族人群=12%:5.4%，p

4、=0.005），而苗族與布依族之間未見差異。同時發(fā)現(xiàn)三個位點不存在完全的連鎖不平衡，單倍體型分析顯示漢族的CTC型頻率高于苗族與布依族，苗族的ATT型頻率高于漢族與布依族。
　　（2）以三個位點均未突變?yōu)閷φ?-1065CC,-855TT,-778TT)，熒光活性顯示apo M T-778C位點CC型轉(zhuǎn)錄活性明顯低于對照;對apo M的表達水平分析發(fā)現(xiàn)單倍體CTC型apo M水平明顯低于其他基因型，T-778C位點CT+CC型ap

5、o M水平明顯低于TT型。
　?。?） apo M與血脂相關(guān)分析顯示apo M與HDL-C正相關(guān),血脂比較發(fā)現(xiàn)單倍體CTC型HDL-C明顯低于其他基因型；T-778C位點CT+CC型HDL-C水平明顯低于TT型。
　?。?）三個民族組間apo M和血脂比較發(fā)現(xiàn)漢族TC明顯高于苗族和布依族人群。
　　結(jié)論：apo M基因啟動子區(qū)C-1065A和T-778C位點存在民族差異,貴州漢族人群apo M-778位點C等位基因遺傳