siRNA干擾NBS1基因表達(dá)聯(lián)合順鉑對三陰性乳腺癌細(xì)胞MDa-MB-231增殖、凋亡和周期的影響.pdf

1、目的：探討siRNA敲低NBS1基因表達(dá)聯(lián)合順鉑對三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖、凋亡和周期的影響。
　　方法：收集長海醫(yī)院和瑞金醫(yī)院2001年至2011年間收治的乳腺癌患者，共收集乳腺癌標(biāo)本138例、正常癌旁乳腺組織97例，制作成組織芯片后，使用免疫組化方法明確NBS1蛋白在乳腺癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)情況。使用卡方檢驗(yàn)比較乳腺癌組織組與癌旁組織組中NBS1蛋白陽性表達(dá)的比例。通過構(gòu)建NBS1干擾質(zhì)粒和陰性空載質(zhì)粒

2、，并通過腺病毒載體感染三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞，蛋白印跡法明確NBS1基因表達(dá)受抑制情況;CCK-8法檢測干擾NBS1表達(dá)后順鉑對MDA-MB-231細(xì)胞體外增殖能力的影響;流式細(xì)胞法檢測感染后實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡和周期情況。
　　結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示，乳腺癌組織組和癌旁正常組織組的NBS1表達(dá)的陽性率分別是80.43％和15.46％，乳腺癌組織中NBS1的陽性表達(dá)率明顯高于癌旁組織，經(jīng)卡

3、方檢驗(yàn)p＜0.05，兩者陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。蛋白印跡法檢測結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組NBS1蛋白表達(dá)水平明顯低于陰性對照組和空白對照組(P＜0.05);CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，同時(shí)在順鉑的作用下，與陰性對照組和空白對照組相比，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖能力明顯受到抑制(P＜0.05);流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組聯(lián)合順鉑與陰性對照組聯(lián)合順鉑相比凋亡率上升(P＜0.05);流式細(xì)胞儀測定周期結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組聯(lián)合順鉑乳腺癌細(xì)胞出現(xiàn)G1期蓄積以及細(xì)胞進(jìn)入M期和G