siRNA干擾AIB3對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231侵襲和轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、AIB3是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)多效性的核受體共激活因子，它參與調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄及細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、增殖、凋亡等諸多生物學(xué)過(guò)程。作為核受體共調(diào)節(jié)因子，AIB3不僅與核受體相互作用，而且還與許多跟腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子相互作用，在許多信號(hào)通路中發(fā)揮作用。
　　AIB3在多種惡性腫瘤細(xì)胞中都有高水平表達(dá)，其中10％的乳腺癌，30%的大腸癌和13%的肺癌中AIB3都有較高拷貝。本研究通過(guò)人工合成AIB3特異性的siRNA抑制AIB3的

2、表達(dá)，觀察干擾后對(duì)乳腺癌細(xì)胞株 MDA-MB-231的生物學(xué)特性的影響，特異性 siRNA干擾 AIB3，干擾后探索性的檢測(cè)與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的兩個(gè)經(jīng)典通路 NF-κB和TGF-β的變化。我們用TRIZOL法提取總RNA，再逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，對(duì)P50、P65、smad2、smad3和MMP-9基因進(jìn)行PCR檢測(cè)，從而揭示AIB3在乳腺癌晚期促進(jìn)乳腺腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。
　　siRNA對(duì)AIB3進(jìn)行特異性對(duì)干擾，干擾后NF-

3、κB的兩個(gè)亞基P50和P65表達(dá)被明顯抑制，這也說(shuō)明NF-κB得到了有效地控制，TGF-β的兩個(gè)重要轉(zhuǎn)到信號(hào)分子smad2和smad3也相應(yīng)的受到了抑制，這充分說(shuō)明核受體共激活因子AIB3對(duì)NF-κB和TGF-β通路的影響。此外，我們還對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的重要分子標(biāo)志MMP-9進(jìn)行的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)MMP-9的表達(dá)得到了非常明顯的抑制。這些數(shù)據(jù)至少在mRNA水平上充分證明AIB3對(duì)乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移具有一定影響，并且這種影響是通過(guò)NF-κB和