納秒脈沖電場誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231凋亡的研究.pdf

1、背景與目的：
　　 動物實驗及臨床前期研究表明，納秒脈沖(nanosecondpulsedelectricfieldsnsPEFs)具有能量高，微創(chuàng)操作，不需聯(lián)合化療藥物等優(yōu)點。本研究將納秒脈沖作用于體內(nèi)及體外培養(yǎng)的乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞，觀察其凋亡情況并且研究其發(fā)生的分子機(jī)制。
　　 方法：
　　 分別用不同參數(shù)的納秒脈沖作用于人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231，使用細(xì)胞活性計數(shù)法、細(xì)胞計數(shù)試劑盒(ce

2、llcountingKit-8，CCK-8)、DNA梯度法、細(xì)胞TUNEL染色法和流式細(xì)胞儀檢測其對腫瘤細(xì)胞增殖、周期和凋亡的影響，透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化，Transwell法檢測遷移力和侵襲力的變化，JC-1實驗檢測線粒體膜電位變化，免疫熒光法檢測Caspase通路蛋白變化以及動物實驗觀察納秒脈沖治療后腫瘤大小、形態(tài)及生長速度等的變化。
　　 結(jié)果：
　　 納秒脈沖在體外可以顯著降低細(xì)胞活性，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，表現(xiàn)為CC

3、K-8實驗組細(xì)胞活性抑制率在24h，48h，72h分別為20KV/cm，71.78％，78.60％，82.13％；40KV/cm，80.92％，89.16％，92.13％；60KV/cm，82.94％90.70％，92.95％，與對照組抑制率0％相比均具有顯著性差異(P<0.01)，且各實驗組之間也具有顯著性差異(P<0.01)；同時觀察到大片段DNA生成，TUNEL陽性率0KV/cm，0.588％；20KV/cm，1.912％；40K

4、V/cm，8.175％；60KV/cm，2.766％，各組間均具有差異(P<0.05)；FCM提示納秒脈沖可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，阻滯腫瘤細(xì)胞生長周期于M期，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增生，與TEM觀察的細(xì)胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)變化的結(jié)果相符；Transwell提示納秒脈沖治療后有基質(zhì)膠及無基質(zhì)膠實驗中腫瘤細(xì)胞穿透小室的細(xì)胞個數(shù)明顯減少，提示侵襲力與遷移力均顯著下降；JC-1實驗提示經(jīng)納秒脈沖治療后腫瘤細(xì)胞線粒體膜電位顯著下降，提示細(xì)胞出現(xiàn)早期凋亡，同時Ca