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文檔簡介
1、目的:腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因(metastasis associated 1,MTA1)是最近發(fā)現(xiàn)的一種基因,與許多腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移程度有關(guān)。本研究旨在探索通過RNA干擾技術(shù)抑制MTA1的表達對乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖及細胞周期的影響,為乳腺癌的基因治療提供一定的指導意義。 方法:(1)設(shè)計并合成具有MTA1特異性的一組寡核苷酸片段,克隆到pGenesil-1載體;(2)用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染和G4
2、18篩選等方法,建立能穩(wěn)定表達靶向MTA1的shRNA的MDA-MB-231細胞株,并對其MTA1表達水平進行檢測;(3)利用細胞生長曲線、MTT法及流式細胞儀檢測抑制MTA1基因?qū)DA-MB-231細胞增殖和周期的影響;(4)通過RT-PCR和免疫組化檢測MTA1基因抑制后cyclinD1表達水平; 結(jié)果:(1)設(shè)計并合成了3條針對MTA1基因的shRNA,它們能顯著抑制MDA-MB-231細胞中MTA1基因的表達,同時能使
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