ZIC1基因在乳腺癌中的表達及其對乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:
　　探討小腦鋅指結(jié)構(gòu)1(Zinc finger of the cerebellum1，ZIC1)基因在人乳腺癌組織中的表達并分析其意義;構(gòu)建pcDNA3.1-ZIC1質(zhì)粒，通過轉(zhuǎn)染改變?nèi)橄侔┘?xì)胞中ZIC1基因的表達水平，進而研究該基因?qū)?xì)胞增殖能力的影響，以期為乳腺癌的分子診斷、預(yù)后評估及基因治療提供新的理論依據(jù)。
　　方法:
　　(1)采用免疫組織化學(xué)(IHC)法檢測238例乳腺癌組織和40例癌旁組織中ZIC

2、1蛋白的表達情況。
　　(2)采用統(tǒng)計學(xué)方法分析ZIC1蛋白的表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系及意義。
　　(3)采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pcDNA3.1-ZIC1質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞（實驗組），以未轉(zhuǎn)染細(xì)胞和轉(zhuǎn)染pcDNA3.1空載體細(xì)胞作為對照。
　　(4)采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)及蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)法檢測各組細(xì)胞中ZIC1 mRNA和蛋白的表達情況。
　

3、　(5)采用噻唑蘭(MTT)法檢測各組細(xì)胞增殖能力的變化，并繪制細(xì)胞生長曲線。
　　結(jié)果:
　　(1)ZIC1蛋白陽性表達率在癌旁組織中為77.5％(31/40)，而在乳腺癌組織中僅為39.1％(93/238)，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(2)ZIC1蛋白的表達與乳腺癌患者的病理分型、組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性(P＜0.05);而與患者的年齡、腫瘤大小、雌激素受體、孕激素受體無相關(guān)性（P＞0.05

4、）。
　　(3)RT-PCR及Western Blot法檢測結(jié)果顯示，與陰性對照組和空白對照組相比較，實驗組中ZIC1 mRNA和蛋白的表達增強。
　　(4)MTT法檢測結(jié)果顯示，與陰性對照組和空白對照組相比較，實驗組細(xì)胞的增殖能力顯著減弱。
　　結(jié)論:
　　(1)與癌旁組織相比，乳腺癌組織中ZIC1蛋白的陽性表達率明顯下降。
　　(2)ZIC1蛋白的表達與乳腺癌患者的病理分型、組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)