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文檔簡介
1、目的:探討靶向沉默Sox2基因?qū)θ橄侔㎝DA-MB-231細胞增殖侵襲和凋亡的影響及其可能的機制。
方法:構(gòu)建靶向Sox2基因的shRNA重組載體,將其轉(zhuǎn)染至乳腺癌MDA-MB-231細胞中,Q-PCR檢測細胞中Sox2 mRNA的表達,F(xiàn)CM檢測細胞凋亡的情況,Transwell檢測細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力,MTS檢測細胞活力和增殖能力,Western blot檢測β-catenin和Sox2蛋白的表達。
結(jié)果:成功構(gòu)
2、建重組載體pMafic7.1-shRNA-Sox2。將pMafic7.1-shRNA-Sox2轉(zhuǎn)染至MDA-MB-231細胞后,Sox2 mRNA的表達水平明顯下調(diào),β-catenin蛋白的表達水平明顯下調(diào),細胞凋亡率明顯增加,細胞的侵襲能力,以及活力和增殖能力均明顯下降,與空白對照組(未轉(zhuǎn)染組)和陰性對照組(轉(zhuǎn)染pMafic7.1-shRNA-NC)相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:靶向沉默Sox2基因能促進
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