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文檔簡介
1、目的:本實驗通過Hedgehog(HH)信號轉導途徑的抑制劑Cyclopamine作用于人乳腺癌MDA-MB-231細胞,研究Hedgehog信號轉導途徑對乳腺癌MDA-MB-231細胞增殖與凋亡以及對CyclinD1表達的影響。 方法: 1.以MDA-MB-231細胞為研究對象,應用Cyclopamine處理后,用MTT方法檢測細胞增殖活性的改變; 2.用流式細胞術檢測細胞周期與凋亡的情況; 3.RT-
2、PCR檢測GLI1、CyclinD1的mRNA的變化; 4.用免疫細胞化學術檢測細胞中的CyclinD1蛋白表達的變化。 結果: 1.與對照組相比,Cyclopamine可顯著抑制MDA-MB-231細胞的生長并呈時效-量效關系; 2.流式細胞術檢測MDA-MB-231細胞,發(fā)現(xiàn)Cyclopamine能提高細胞周期G0/G1期的比例,48h后出現(xiàn)明顯的“亞G1”峰; 3.GLI1,CyclinD1
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