侵染醴腸的雙生病毒及其伴隨的DNAβ的分子鑒定.pdf

1、雙生病毒是植物病毒中唯一的一類具有孿生顆粒形態(tài)的單鏈環(huán)狀DNA病毒(singlestranded DNA，ssDNA)，雙生病毒可侵染雙子葉和單子葉植物，且在田間通常為復合侵染，導致作物大范圍受害。該病毒一般發(fā)生在熱帶、亞熱帶地區(qū)，溫帶地區(qū)也有發(fā)生。在我國的云南、廣西、廣東、海南等省的番茄、南瓜和番木瓜等多種重要作物上都發(fā)現(xiàn)了雙生病毒的危害，有的甚至是毀滅性的危害。 本文利用雙生病毒的簡并引物PA和PB，對福建省福州和龍巖兩地的

2、雜草醴腸(Eclipta prostrate)進行PCR檢測，結(jié)果均檢測到了雙生病毒。經(jīng)測序，檢測到的F30和F31兩分離物均為空心蓮子草黃脈病毒(Alternanthera yellow vein virus，AlYVV)的分離物。對兩分離物DNA-A的全序列分析表明：F30及F31基因組DNA-A核酸序列相似性為96.4％。兩分離物與亞洲報道的粉虱傳雙生病毒的基因組相似性較高，而與非洲、地中海地區(qū)報道的雙生病毒相似性較低。F30與其

3、它雙生病毒比較得：其全基因組DNA-A與空心蓮子草黃脈病毒(AlYVV)同源性最高，為96.4％；IR區(qū)與AlYVV-[Hn51]最為相似，具有90.3％的同源性。其4個ORFs編碼的氨基酸序列與AlYVV、AlYVV-[PT1]、AlYvV-[Zin]和AlWV-[G38]分別具有最高的同源性。應用擴增DNAβ分子的通用引物對F30和F31進行：PCR擴增，結(jié)果在F30中得到一個DNAβ分子(F30β)。全序列測定分析表明：F30β全

4、長1350nt，其互補鏈編碼1個13.7kDa的βCl蛋白；其全序列與番茄曲葉病毒F09分離物相伴隨的DNAB(Tomato leaf curl virus-[F09]，ToLCV-F09β)同源性最高，達96.7％；βC1編碼的氨基酸序列與ToLCV-F09β和ToLCVp最為相似。通過分離物F30 DNA-A和DNAD的序列分析結(jié)果可推測，福建省醴腸雜草上可能存在空心蓮子草黃脈病毒(A1YVV)和番茄曲葉病毒(ToLCV)的混合侵染