維生素B1對百草枯中毒大鼠急性肺損傷保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：本研究通過建立百草枯(Paraquat， PQ)中毒大鼠模型，觀察維生素B1對百草枯中毒大鼠急性肺損傷的保護作用及其機制。
　　 方法：66只健康成年雄性SD大鼠隨機分為四組：正常對照組（Control， NC組）6只、百草枯染毒組（Paraquat， PQ組）20只、百草枯+低劑量維生素B1組(Paraquat+Low-dose Vitamin B1，PQ+LVB組)20只和百草枯+高劑量維生素B1組（Paraquat+

2、High-dose Vitamin B1, PQ+HVB組）20只。NC組給予1ml生理鹽水灌胃，0.5h后給予1ml生理鹽水灌胃；PQ組給予100mg/kg PQ灌胃，0.5h后給予1ml生理鹽水灌胃；PQ+LVB組給予100mg/kg PQ灌胃，0.5h后給予100mg/kg維生素B1灌胃；PQ+HVB組給予100mg/kg PQ灌胃，0.5h后給予200mg/kg維生素B1灌胃。在染毒的第1、3、7d分批處死動物。心臟采血，37℃

3、放置2h，離心取上清液，常規(guī)方法取肺組織。分別測定血清和肺組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量以及肺組織中羥脯氨酸(HYP)含量；選取肺臟、腎臟進行常規(guī)HE、MASSON染色，觀察病理組織學變化。免疫組織化學方法檢測轉化生長因子-β1(TGF-β1)在各組大鼠肺組織中的表達。
　　 結果：
　　 1.大鼠中毒表現(xiàn)：一般于染毒后2小時內(nèi)各系統(tǒng)出現(xiàn)明顯中毒癥狀，在1-3天最為明顯。
　　 2.血清

4、中SOD、MDA含量：實驗期間各時間點PQ組血清SOD活力明顯低于NC組(P＜0.05)。隨著時間的延長，PQ組血清SOD活力下降，d7較d1明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。隨著時間的延長，維生素B1兩個劑量組大鼠血清SOD活力呈現(xiàn)下降趨勢。在相同時間點均高于PQ組，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。在第7天PQ+HVB組血清SOD活力高于PQ+LVB組，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。各組大鼠血清MDA含量與SOD活力呈現(xiàn)

5、相反的規(guī)律。
　　 3.肺組織勻漿中SOD、MDA含量：實驗期間各時間點PQ組肺組織SOD活力明顯低于NC組(P＜0.05)。隨著時間的延長，PQ組肺組織SOD活力下降，d7較d1明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。隨著時間的延長，維生素B1兩個劑量組大鼠肺組織SOD活力呈現(xiàn)下降趨勢。在相同時間點均高于PQ組，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。在第7天PQ+HVB組肺組織SOD活力高于PQ+LVB組，具有統(tǒng)計學意義(P＜

6、0.05)。各組大鼠肺組織MDA含量與SOD活力呈現(xiàn)相反的規(guī)律。
　　 4.肺組織羥脯氨酸含量：各組大鼠肺組織羥脯氨酸含量在第1天和第3天均沒有明顯差異(P＞0.05)。第7天各組HYP高于NC組(P＜0.05)。PQ+HVB組HYP值均低于PQ組和PQ+LVB組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 5.肺組織病理學改變：大體標本觀察，NC組肺臟基本正常。PQ組肺臟腫脹變大，表面呈深暗紅色，有明顯的出血點或淤血。

7、第7d局部肺組織變蒼白，出現(xiàn)灰白色凹凸不平病灶。維生素B1干預后病變有所減輕，且以PQ+HVB組明顯。光鏡觀察：NC組肺泡結構完整，正常。PQ組可見肺泡出血、纖維蛋白滲出，肺泡壁毛細血管擴張及炎性細胞浸潤。維生素B1干預后病變有所減輕，且以PQ+HVB組明顯。Masson染色可見正常組很少有藍綠色膠原纖維沉積在支氣管壁及肺泡間隔，而PQ組第7天時較多藍色膠原纖維沉積與支氣管壁及肺泡間隔，PQ+HVB組藍染膠原沉積較少。
　　 6

8、.免疫組化結果：NC組TGF-β1基本沒有表達。PQ組TGF-β1表達在染毒后7d開始明顯，PQ+LVB組和PQ+HBv組病變較輕。
　　 7.腎組織病理變化：大體標本呈暗紅色，飽滿，質不硬，切面皮髓分界清晰。光鏡：NC組可見腎小球及腎小管結構清晰，小管內(nèi)未見管型及顆粒。PQ組可見腎小管上皮細胞腫脹，伴空泡和顆粒變性。PQ+LVB組和PQ+HBV組病變較輕。
　　 結論：
　　 1.PQ中毒后大鼠體內(nèi)出現(xiàn)明顯氧化