硫辛酸通過Nrf2-ARE信號通路對百草枯中毒致大鼠急性肺損傷保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究硫辛酸對百草枯中毒致大鼠急性肺損傷抗氧化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子核因子相關(guān)因子2(Nuclearfactor-erythroid2-relatedfactor,Nrf-2)和亞鐵血紅素氧化酶1(Hemeoxygenase1,HO-1)表達(dá)的影響,探討硫辛酸保護(hù)百草枯肺的作用機(jī)制。
　　方法：SPF級健康成年雄性Sprage-Dawley大鼠,共72只。隨機(jī)分為正常對照組(CONTROL組12只)、百草枯中毒組(paraquat,PQ

2、組30只)和百草枯中毒+硫辛酸干預(yù)組(paraquat+LA,LA組30只),CONTROL組分為6h和72h亞組,PQ組和LA組動物按觀察時(shí)點(diǎn)6h、12h、24h、48h、72h隨機(jī)分成五個(gè)亞組(每個(gè)亞組各6只)。CONTROL組給以等量的生理鹽水腹腔注射;PQ組以百草枯25mg/kg一次性腹腔注射染毒造模,LA組在給予百草枯25mg/kg一次性腹腔注射染毒半小時(shí)后尾靜脈給予LA100mg/kg,24h,48h,72h亞組分別于每日同

3、一時(shí)間點(diǎn)尾靜脈給予LA100mg/kg,直至處死時(shí)為止。每日稱量大鼠體重,分別在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死后取大鼠肺組織,測量其肺系數(shù),取大鼠左肺組織相同部位進(jìn)行HE染色及免疫組織化學(xué)檢測;取右肺相同部位組織檢測GSH-Px、SOD活力;提取右肺組織中總RNA,用RT-PCR法測Nrf-2,HO-1水平。
　　結(jié)果：①體重與肺系數(shù):PQ組和LA組體重和肺系數(shù)均較CONTROL組降低,12h,24h,48h,72h點(diǎn)均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.

4、01),LA組在48h和72h點(diǎn)體重降低明顯少于PQ組(P<0.01,P<0.05)肺系數(shù)LA組在24h,48h,72h點(diǎn)明顯低于PQ組(P<0.01,P<0.05);②肺部病理組織學(xué):CONTROL組表現(xiàn)為正常肺部病理組織結(jié)構(gòu),PQ組和LA組肺部病理損傷程度均較CONTROL組嚴(yán)重,但在各個(gè)時(shí)間點(diǎn),LA組損傷程度輕于PQ組;③GSH-Px,SOD活性檢測:GSH-Px活性PQ組和LA組明顯低于CONTROL組,在12h,24h,48h

5、,72h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),LA組在24,48,72h高于PQ組(P<0.01,P<0.05);SOD活性PQ組和LA組明顯低于CONTROL組,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較均有顯著性差異(P<0.01),而LA組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯高于PQ組(P<0.01);④免疫組織化學(xué)半定量分析Nrf-2,HO-1:Nrf-2陽性系數(shù)PQ組和LA組明顯高于CONTROL組,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較均有顯著性差異(P<0.01),LA組在48h,72h點(diǎn)

6、高于PQ組(P<0.01,P<0.05);HO-1陽性系數(shù)PQ組在72h點(diǎn)明顯高于CONTROL組(P<0.01),LA組在72h點(diǎn)明顯高于PQ組(P<0.05),而其他幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);⑤Nrf-2,HO-1mRNA表達(dá):NRF-2mRNA表達(dá)PQ組和LA組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較均高于CONTROL組(P<0.01),而LA組在12h,24h,48h,72h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)NRF-2表達(dá)較PQ組明顯增加(P<0.01,P