姜黃素對(duì)急性百草枯中毒大鼠肝損傷的干預(yù)研究.pdf

1、目的:
　　研究急性百草枯大中毒鼠肝損傷氧化應(yīng)激和炎癥指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化及姜黃素的干預(yù)效果和機(jī)制。
　　方法:
　　1.60只清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為4組，正常對(duì)照組（15只），姜黃素對(duì)照組（15只），百草枯染毒組（15只，質(zhì)量濃度為2％的百草枯溶液100mg/kg灌胃染毒），姜黃素干預(yù)組（15只，在百草枯灌胃染毒后，分別于15min、24h、48h3個(gè)時(shí)間點(diǎn)，腹腔注射姜黃素50mg/kg）。不同處理后，在第1、3、7天麻醉

2、處死大鼠，下腔靜脈取血，高速離心后取上清，并留取肝組織，-80℃保存。
　　2.觀察各組大鼠經(jīng)不同處理后行為學(xué)的改變，如活動(dòng)，呼吸，皮毛及精神狀態(tài)方面的改變，光鏡下觀察各組大鼠肝組織的病理變化情況。
　　3.化學(xué)比色法檢測(cè)血清ALT、AST、TBIL水平變化及肝組織勻漿SOD、CAT活力，MDA含量的變化，RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子Nrf2、TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)情況，Western blot檢測(cè)Nrf2、NF

3、-κB蛋白表達(dá)情況，雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)HO-1、NQO-1、TNF-α、IL-1β、水平變化。
　　結(jié)果:
　　1.正常對(duì)照組和姜黃素對(duì)照組大鼠活動(dòng)自如，反應(yīng)靈敏，皮毛光滑。百草枯染毒組大鼠:在染毒30分鐘后，大鼠活動(dòng)明顯增多，易激惹;6h后，活動(dòng)減少，走路震顫，蜷縮抱團(tuán)，呼吸急促，毛發(fā)戰(zhàn)栗;3天時(shí)癥狀最重，口唇發(fā)紺，口周有紅色的血性分泌物;7天時(shí)大鼠精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，活動(dòng)增加。姜黃素干預(yù)組癥狀較百草枯染毒

4、組輕，7天時(shí)癥狀明顯好轉(zhuǎn)，飲食活動(dòng)增加。光鏡下可見，百草枯染毒組大鼠肝組織在染毒后第3天，病理?yè)p害最嚴(yán)重，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)姜黃素干預(yù)組病理?yè)p害都較同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組有所減輕。
　　2.與正常對(duì)照組相比，姜黃素對(duì)照組各項(xiàng)觀察指標(biāo)無顯著變化(P＞0.05);百草枯染毒組在1、3、7天，MDA水平顯著升高，SOD、CAT活力顯著降低，Nrf2 mRNA和蛋白表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，HO-1、NQO-1活力在第1、3天明顯升高(P＜0.

5、05)，在第7天，NQO-1活力仍明顯高于正常(P＜0.05)。與同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組比較，姜黃素干預(yù)組在第1、3、7天，MDA含量顯著降低，SOD、CAT、HO-1、NQO-1活力顯著升高，Nrf2蛋白和Nrf2mRNA表達(dá)顯著升高(P＜0.05)。
　　3.與正常對(duì)照組比較，百草枯染毒組在第1、3、7天，ALT、AST、TBIL、水平顯著升高(P＜0.05)，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)顯著升高，TNF-α

6、、IL-1β和NF-κB蛋白表達(dá)顯著升高(P＜0.05)。與同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組比較，姜黃素干預(yù)組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，ALT、AST、TBIL水平顯著降低，TNF-α、IL-1β mRNA顯著降低，NF-κB蛋白表達(dá)明顯降低（P＜0.05）
　　結(jié)論:姜黃素通過誘導(dǎo)Nrf2的表達(dá)，升高HO-1、NQO-1、SOD、CAT活力，降低MDA含量，提高肝組織細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激能力;另一方面通過下調(diào)NF-κB的表達(dá)，降低肝組織中TNF-α、IL-