大鼠單側大腦中動脈栓塞后腦血流與腦組織化學的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文大鼠單側大腦中動脈栓塞后腦血流與腦組織化學的研究姓名：李志杰申請學位級別：博士專業(yè)：核醫(yī)學指導教師：裴著果2000.2.1博上研宄生論文二實驗藥品‰I b 0 4 1 ，六甲基丙叉二胺肟，核乳膠( 第一部分) ；碘化乙酰膽堿，硝基藍四唑，甘油磷酸鈉( 第二部分) ：S - 1 0 0 抗體，S A B C 試劑盒，D A B 顯色液( 第三部分) 。三實驗儀器恒冷箱冰凍切片機，孵育箱，恒溫水浴箱，光學顯微鏡，透射

2、電鏡，L u z e x - F 彩色圖像分析儀。實驗方法各部分首先利用血管內(nèi)栓線法制備大鼠單側大腦中動脈栓塞( M C A 0 ) 模型：大鼠實驗前一天晚上禁食，不禁水。麻醉前1 0 分鐘阿托品腹腔注射，用1 ％戊巴比妥麻醉。頸正中切口暴露頸總動脈，分離節(jié)扎頸外動脈分支，節(jié)扎頸外動脈主干。分離頸內(nèi)動脈，節(jié)扎唯一顱外分支翼腭動脈。節(jié)扎頸總動脈。自頸內(nèi)動脈與頸外動脈分叉處插入直徑0 ．2 5 ．O ．3 0 m m 的釣魚線至右側大腦前動

3、脈，插入深度為1 9 ±l m m ，阻斷右側大腦中動脈的所有血液來源，制成腦栓塞模型。第一部分：制備大鼠右側M C A O 模型，將動物分為M C A O3 小時組( n = 1 0 ) ，6 小時組( n = 1 1 ) ，假手術對照組( I l _ 2 ) 及正常對照組( n = 3 ) 。自尾靜脈注入蜘T c ．} 玎㈣2 0 m C i ，3 - 5 分后斷頭處死，迅速取腦，．1 9 6℃液氮中冷凍1 0 秒鐘，置-

4、 2 0 。C 恒冷箱切片機中切片。自額極4 - 6 r a m 做冠狀切片用于T T C 染色，自6 m m 開始進行冠狀連續(xù)問斷切片，其中3 0 u m厚的切片用于x 光膠片自顯影，2 0 u m 厚切片待涂核- S i t e 后進行光鏡及電鏡自顯影，1 4 u m 厚切片用于尼氏染色。以尼氏染色和T T C 染色做病理對照，利用彩色圖像分析系統(tǒng)進行圖像分析。第二部分：制備大鼠右側M C A O 模型，將動物分為M C A OO

5、．5 小時、1 小時、2 小時( n 分別為9 ) 、3 小時、( n = 1 0 ) 及6 小時( n = 1 1 ) 、假手術組( n = 3 ) 及正常對照組( n = 3 ) 。用連續(xù)間斷切片方法制作組織切片，具體方法同第一部分，切片厚1 4 u m ，以尼氏染色做病理對照。通過亞鐵氰化銅法( K a r n o v s k y 和R o o t s 法) 、硝酸鉛法( G o m o r i 法) 和硝基藍四唑法( N a c