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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最多的細(xì)胞類型,約占正常成年人腦細(xì)胞總數(shù)的40%,在提供中樞神經(jīng)系統(tǒng)代謝和營(yíng)養(yǎng)支持、維持正常神經(jīng)元的功能、調(diào)節(jié)突觸等活性方面等方面發(fā)揮重要作用。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidicprotein,GFAP)是腦內(nèi)成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞主要的中間纖維蛋白,是細(xì)胞骨架蛋白,大量的GFAP在星形細(xì)胞中有豐富而特異性的表達(dá),是星形細(xì)胞活化的的標(biāo)志蛋白。局灶性腦缺血后缺血中心
2、區(qū)、缺血半暗帶區(qū)的GFAP的變化已引起人們的廣泛關(guān)注并有了深入研究,近幾年缺血后遠(yuǎn)隔區(qū)部位GFAP的變化也引起人們廣泛的關(guān)注。臨床研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,腦梗死損害并不僅僅限于梗死灶局部,急性期過后神經(jīng)系統(tǒng)遠(yuǎn)離梗死灶的相關(guān)部位也會(huì)發(fā)生繼發(fā)性損害。本實(shí)驗(yàn)的目的觀察右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞后遠(yuǎn)隔部位小腦不同時(shí)期GFAP的表達(dá)變化。
方法
健康雄性Wistar大鼠60只,體質(zhì)量250-300g,隨機(jī)分為假手術(shù)1d組(n=6)
3、、3d組(n=6)、5d組(n=6)、7d組(n=6)、10d組(n=6)。大腦中動(dòng)脈閉塞后1d組(n=6)、3d組(n=6)、5d組(n=6)、7d(n=6)、10d組(n=6)。參照Zea Longa等制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型,Zea Longa的5級(jí)4分法評(píng)分,將評(píng)分在1-3分的動(dòng)物納入下一步實(shí)驗(yàn)。每組取4只大鼠用于HE染色及免疫組化,每組2只用于透射電子顯微鏡觀察。HE染色觀察小腦組織形態(tài)變化,電鏡觀察小腦超微結(jié)構(gòu)變化,免疫組
4、化法檢測(cè)小腦GFAP的表達(dá),然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,(P<0.05)有顯著性差異。
結(jié)果
1、HE染色結(jié)果示:MCAO后1d、3d、5d、7d、10d組與假手術(shù)組比較神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài)分布正常,未見明顯改變。
2、透射電子顯微鏡觀察結(jié)果示:MCAO后左側(cè)小腦皮質(zhì)1d組與假手術(shù)組未見凋亡細(xì)胞。MCAO后3d組可見早期凋亡細(xì)胞,5d組可見晚期凋亡細(xì)胞,7d組可見中期凋亡細(xì)胞,10d組可見早期凋亡細(xì)胞。
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