腦硬死后遠(yuǎn)隔部位小腦皮層NoGo-A蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、目的:少突膠質(zhì)細(xì)胞(OLIG)是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)髓鞘的主要成分，其變化與免疫反應(yīng)之間有一定聯(lián)系。腦缺血損傷后CNS血腦屏障通透性發(fā)生改變，允許血液中的免疫成分進(jìn)入腦內(nèi)，同時(shí)OLIG被轉(zhuǎn)化成抗原提呈細(xì)胞(APC)和免疫效應(yīng)細(xì)胞，釋放各種免疫抑制因子、激活A(yù)PC提呈抗原，發(fā)揮抗原清除作用，抑制腦組織再生及修復(fù)。Nogo-A是CNS髓鞘中主要的軸索抑制因子，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制軸突生長(zhǎng)作用，其主要由OLIG表達(dá)，離體和活體實(shí)驗(yàn)均已證實(shí)它

2、與動(dòng)物CNS神經(jīng)軸索的再生關(guān)系密切。最新文獻(xiàn)報(bào)道，腦梗死造成的神經(jīng)功能缺損不僅與梗死灶局部損傷后神經(jīng)細(xì)胞壞死和凋亡有關(guān)，而且也與遠(yuǎn)隔梗死灶相關(guān)部位的繼發(fā)性神經(jīng)細(xì)胞壞死和凋亡有關(guān)。已有文獻(xiàn)報(bào)道，腦缺血后在缺血邊緣區(qū)及遠(yuǎn)隔部位大量膠質(zhì)細(xì)胞活化增殖，活化的膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)于維持腦微環(huán)境以及防止神經(jīng)元死亡起一定的作用，但過度活化的膠質(zhì)細(xì)胞可以釋放有害因子，并且形成的膠質(zhì)疤痕可通過免疫學(xué)機(jī)制釋放軸索抑制因子（如Nogo-A）影響神經(jīng)元軸突的生長(zhǎng)、突觸的

3、重建及阻斷腦組織微循環(huán)，這表明腦梗死后遠(yuǎn)隔部位的繼發(fā)性損傷與Nogo-A蛋白的抑制作用密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用改良的Zea Longa法制備持續(xù)性閉塞大鼠大腦中動(dòng)脈的腦缺血模型，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法觀察遠(yuǎn)隔部位小腦皮層Nogo-A蛋白的動(dòng)態(tài)表達(dá)。
　　 方法:健康雄性SPF級(jí)SD(Sprague-Dawley)大鼠60只，體質(zhì)量250-280g，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（n=30，制作大腦中動(dòng)脈閉塞模型）和假手術(shù)對(duì)照組(n=30)，每組又按大腦

4、中動(dòng)脈閉塞時(shí)間的不同隨機(jī)分為1d、3d、5d、7d、10d五個(gè)亞組，每個(gè)亞組6只大鼠。參照Zea Longa法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型，Zea Longa的5級(jí)4分法評(píng)分，將評(píng)分在1-3分的動(dòng)物納入下一步實(shí)驗(yàn)。HE染色觀察小腦組織形態(tài)變化，免疫組化法檢測(cè)小腦皮層Nogo-A蛋白的表達(dá)，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0.05有顯著性差異。
　　 結(jié)果:
　　 1、HE染色結(jié)果示：大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)后1d、3d、5d、7

5、d、10d組與假手術(shù)組比較，神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài)分布正常，未見明顯改變。
　　 2、免疫組織化學(xué)檢測(cè)Nogo-A蛋白表達(dá)：Nogo-A蛋白陽性免疫反應(yīng)產(chǎn)物主要分布于OLIG的胞漿，染色呈棕黃色細(xì)顆粒沉積。假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)Nogo-A蛋白表達(dá)無明顯差異；MCAO組Nogo-A蛋白的表達(dá)于術(shù)后第5d、7d、10d較假手術(shù)組明顯增高，第1d、3d無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論:大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞后遠(yuǎn)隔部位小腦皮層Nogo-A蛋白呈