Snord116基因敲除小鼠Ghrelin水平升高的機(jī)制及其胃神經(jīng)系統(tǒng)的研究.pdf

1、Prader-Willi綜合癥(簡(jiǎn)稱PWS)是一種最常見(jiàn)的由遺傳引起的肥胖癥，其最顯著的臨床表征是病人無(wú)法控制的饑餓感和過(guò)度飲食。遺傳學(xué)的研究以及最新的證據(jù)證實(shí)了Snord116是導(dǎo)致PWS的最關(guān)鍵的基因。本實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建了Snord116基因敲除小鼠，對(duì)該種小鼠進(jìn)行了多方面的研究和測(cè)量。Snord116基因敲除小鼠一個(gè)豐常值得關(guān)注的表征是：該種小鼠飽食情況下Ghrelin的水平是正常小鼠的3倍，相當(dāng)于正常小鼠饑餓24小時(shí)后的水平。Gh

2、relin作為目前唯一己知的“饑餓激素”，可以引起動(dòng)物和人的進(jìn)食行為。PWS病人無(wú)法抑制的饑餓感和過(guò)食行為與Ghrelin含量升高有無(wú)必然的聯(lián)系目前還不清楚。為了回答該問(wèn)題，本課題構(gòu)建了兩個(gè)質(zhì)粒，分別用于Ghrelin基因敲除和轉(zhuǎn)基因小鼠。目標(biāo)是在Snord116基因敲除小鼠中進(jìn)一步敲除Ghrelin基因，檢測(cè)Ghrelin是Snord116敲除小鼠過(guò)食行為的必要條件。
　　 PWS病人Ghrelin的水平為正常值的3倍，本文利

3、用免疫熒光和RT-PCR的方法分別在細(xì)胞水平和mRNA水平上對(duì)Ghrelin水平升高的原因進(jìn)行了初步的探索。免疫熒光顯示Snord116基因敲除小鼠胃內(nèi)Ghrelin細(xì)胞的形態(tài)、大小、分布的位置以及數(shù)量較野生型小鼠沒(méi)有明顯的區(qū)別。RT-PCR測(cè)定胃內(nèi)Ghrelin mRNA表明，Snord116基因敲除小鼠胃內(nèi)Ghrelin mRNA水平較野生型沒(méi)有太明顯的升高，這與免疫熒光結(jié)果一致。
　　 Snord116是一個(gè)非編碼的小核仁

4、RNA，但其生物學(xué)功能目前還不清楚。一般的小核仁RNA主要是以復(fù)合物的狀態(tài)通過(guò)甲基化修飾來(lái)調(diào)控基因的表達(dá)。本文利用甘油梯度離心的方法確定了Snord116復(fù)合物的大小約在700KD，比一般的小核仁RNA復(fù)合物是一個(gè)非常大的復(fù)合物，其生物學(xué)功能可能也非常復(fù)雜。
　　 基于Snord116在腦組織及所有的神經(jīng)中都有表達(dá)以及本實(shí)驗(yàn)室前期的各項(xiàng)測(cè)量數(shù)據(jù)，我們懷疑Snord116基因敲除小鼠神經(jīng)發(fā)育異常，尤其是胃部神經(jīng)發(fā)育異?？赡苁窃斐蒅