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文檔簡介
1、本試驗主要探討了蛋黃卵磷脂的提取工藝,以期獲得簡單、經(jīng)濟、高效、適合規(guī)?;a(chǎn)的蛋黃卵磷脂提取方法,分別從蛋黃卵磷脂檢測方法、提取方法、提取條件三個方面進(jìn)行了研究。
試驗中主要對蛋黃卵磷脂的三種檢測方法進(jìn)行了研究:鉬黃比色法、紫外分光光度法和薄層色譜法(TLC)。鉬黃比色法對卵磷脂的總含量進(jìn)行測定,主要比較了不同氧化鋅加入量對鉬黃比色法的影響。紫外分光光度法對卵磷脂的主要成分PC(磷脂酰膽堿)進(jìn)行定性、定量檢測。薄層色譜法
2、對蛋黃卵磷脂中的PC和PE(磷脂酰乙醇胺)進(jìn)行定性檢測,主要對展開劑的配制、薄層板的活化和層析時間進(jìn)行了研究。
在蛋黃卵磷脂傳統(tǒng)有機溶劑提取的基礎(chǔ)上,本試驗通過比較三種蛋黃卵磷脂提取方法,更加深入具體的研究了乙醇和丙酮這兩種有機溶劑在蛋黃卵磷脂提取中相互作用的問題。試驗中以新鮮蛋黃液為提取原料,研究了乙醇提取法、先乙醇后丙酮提取法和先丙酮后乙醇提取法,并比較了不同乙醇濃度對蛋黃卵磷脂提取效果的影響,通過已建立的卵磷脂檢測方
3、法對自制卵磷脂進(jìn)行檢測。
主要的試驗內(nèi)容和結(jié)論如下:
1、三種檢測方法配合應(yīng)用,定性和定量檢測蛋黃卵磷脂:鉬黃比色法測定中,0.1g樣品需1g氧化鋅輔助灰化,磷標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=18.485x+0.0135,線性關(guān)系良好;蛋黃PC標(biāo)準(zhǔn)品紫外掃描圖波形較好,最大吸收波長為210nm,紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=3.6915x+0.0077,此方程線性關(guān)系良好,紫外分光光度法的重復(fù)性和穩(wěn)定性都較好;薄層色譜法的展開劑配比為
4、V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水)=65∶25∶4,薄層板的活化方式為105℃1h,層析距離為10cm。
2、乙醇最適提取濃度隨提取方法不同而變化:乙醇作為卵磷脂提取的首選溶劑,試驗發(fā)現(xiàn)不同提取方法的最適乙醇濃度不同,乙醇提取法和先乙醇后丙酮提取法的最適乙醇濃度為95%,先丙酮后乙醇提取法的最適乙醇濃度為90%。
3、乙醇與丙酮提取順序決定蛋黃卵磷脂的純度和含量:乙醇可以有效地提取蛋黃卵磷脂,丙酮的處理可以顯著
5、提高卵磷脂的純度。先丙酮后乙醇提取法較先乙醇后丙酮提取法獲得的卵磷脂的純度更高,但是含量低。綜合卵磷脂純度和含量兩方面,先乙醇后丙酮提取法為最優(yōu)提取法。自制蛋黃卵磷脂紫外掃描圖波形較好,與蛋黃卵磷脂標(biāo)準(zhǔn)品基本吻合,最大吸收波長都位于210nm處。在薄層色譜圖中,自制卵磷脂的主要成分PC、PE與卵磷脂標(biāo)準(zhǔn)品分別位于同一水平位置,且具有較高的純度。
4、蛋黃預(yù)處理對蛋黃卵磷脂提取的影響:試驗采用蛋黃粉、新鮮蛋黃液和凍融蛋黃液三
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