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文檔簡介
1、目的:1、建立一種較為方便、穩(wěn)定的研究大鼠慢性移植物血管病的動物模型:2、研究RT1-E基因?qū)Υ笫舐砸浦参镅懿∽兊淖饔谩?br> 方法:1、選用近交系的雄性Lewis大鼠為供體,雄性F344大鼠為受體,記90對,將供者腹主動脈原位移植入受者體內(nèi),建立大鼠腹主動脈原位移植模型。2、構(gòu)建攜帶RT1-E基因的腺病毒載體并轉(zhuǎn)染供者腹主動脈內(nèi)皮細胞,觀察RT1-E基因表達對移植后血管內(nèi)皮增生的影響。根據(jù)移植物是否轉(zhuǎn)染RT1-E基因?qū)⑹荏w
2、分為三組,空白對照組30只,無腺病毒轉(zhuǎn)染,陰性對照組30只,轉(zhuǎn)染空腺病毒載體,實驗組30只,轉(zhuǎn)染攜帶RT1-E基因的腺病毒載體,規(guī)定獲取受體標本的時間點為15天,30天和60天,每組每個時間點10只大鼠。所有受體術(shù)后10天內(nèi)每天給與CsA0.15mg/kg im抑制急性排斥反應。
結(jié)果:共完成大鼠腹主動脈原位移植90例,移植手術(shù)缺血時間28.6±4.3min,手術(shù)時間56.2±8.9min。手術(shù)并發(fā)癥:麻醉過深死亡1只,術(shù)
3、后不明原因死亡1只,術(shù)后截癱1只。手術(shù)成功率96.7%。成功構(gòu)建攜帶RT1-Eu基因的腺病毒載體并轉(zhuǎn)染至供體血管內(nèi)皮。組織病理學檢查顯示三組受體在移植后15天均出現(xiàn)血管內(nèi)皮動脈硬化樣改變,內(nèi)皮細胞脫落,血管壁大量淋巴組織浸潤,30天及60天時移植血管動脈硬化樣改變更加明顯,內(nèi)皮下出現(xiàn)明顯的增生層,三組血管壁慢性排斥病理改變無明顯差異。免疫組化顯示與慢性移植物血管病相關(guān)的細胞因子IL-2、IL-4、PDGF、IGF-1、γ-IFN、C4d
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