整合素連接酶在慢性移植腎病中的作用與機(jī)制.pdf

1、目的：探討整合素連接酶(ILK)在慢性移植腎病(CAN)的作用與機(jī)制。方法：實(shí)驗(yàn)組腎移植受體為近交系雄性Lewis大鼠40只，供體為近交系雄性Fisher大鼠40只，依照標(biāo)準(zhǔn)的慢性移植腎病大鼠模型要求行左腎原位移植，術(shù)后7天切除右腎。對(duì)照組分別為單純右腎切除的Lewis大鼠及Fisher大鼠各25只。分別于4周、8周、12周、16周及24周時(shí)收獲大鼠，同時(shí)做腎功能、腎組織學(xué)檢測，應(yīng)用免疫組織化學(xué)與Western-blot方法測定腎組織中

2、ILK的表達(dá)，RT-PCR方法檢測ILKmRNA表達(dá)，同時(shí)分別運(yùn)用免疫組化、Western-blot方法檢測ILK作用有關(guān)的信號(hào)傳導(dǎo)通路磷酸化蛋白激酶B(pAKT)、磷酸化糖原合成酶3β(pGSK-3β)及其效應(yīng)因子磷酸化肌球蛋白輕鏈(pMLC)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)。結(jié)果：移植組大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平16周時(shí)顯著增高，24周時(shí)更為顯著。移植4周時(shí)腎間質(zhì)可見單個(gè)核細(xì)胞浸潤，12周時(shí)可見

3、血管平滑肌細(xì)胞的移行與增殖，24周時(shí)可見輕度腎間質(zhì)纖維化、血管硬化及管腔狹窄。RT-PCR結(jié)果顯示，移植組各時(shí)相ILKmRNA表達(dá)水平顯著高于同時(shí)相F344對(duì)照組或LEW對(duì)照組，且隨著移植時(shí)間的延長，ILKmRAN表達(dá)水平有逐步增高趨勢。移植組各時(shí)相ILK、pAKT、pMLC、VEGF表達(dá)水平顯著高于同時(shí)相F344或LEW對(duì)照組，pGSK-3β顯著低于同時(shí)相Fisher或Lewis對(duì)照組，且隨著移植時(shí)間的延長這一趨勢更為顯著；移植4W組

4、MMP-9表達(dá)水平顯著增高，16W、24W是則顯著低于同時(shí)相對(duì)照組。Spearman等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示，腎移植大鼠在ILK表達(dá)水平與腎間質(zhì)單個(gè)核細(xì)胞浸潤、腎間質(zhì)纖維化、腎小球硬化及血管硬化程度呈顯著正相關(guān)，與pAKT、pMLC、VEGF、MMP-9表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)，與pGSK-3β表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論：ILK在慢性移植腎病病理變化中發(fā)揮重要作用，其機(jī)制可能是通過作用于AKT、GSK傳導(dǎo)通路，進(jìn)而導(dǎo)致移植腎組織腎間質(zhì)單個(gè)核細(xì)胞浸潤、血