染料木黃酮防治大鼠慢性移植物血管病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目前,器官移植已經(jīng)成為臨床治療終術(shù)期疾病有效和常規(guī)的措施.然而,盡管由于外科技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化、免疫抑制劑的不斷研發(fā)和應(yīng)用,過去20年間,移植物的長(zhǎng)期存活率仍未明顯提高.免疫抑制劑的成功應(yīng)用,有效地抑制了急性排斥反應(yīng),但不能有效地控制可導(dǎo)致移植物失功的慢性排斥反應(yīng)的發(fā)生.通過建立大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型,術(shù)后給予染料木黃酮干預(yù),分析移植段動(dòng)脈內(nèi)膜HE染色形態(tài)學(xué)變化,檢測(cè)多種細(xì)胞因子在延緩慢性排斥反應(yīng)中的作用,驗(yàn)證染料木黃酮在延緩慢性排

2、斥反應(yīng)中的效果,同時(shí)研究其作用機(jī)理,為染料木黃酮在慢性排斥反應(yīng)的臨床治療提供理論依據(jù). 第一部分大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型的建立 目的：探討建立大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型的方法和意義. 方法：將健康Brown-Norway大鼠和Lewis大鼠,建立腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型.分對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,Lewis大鼠-Lewis大鼠同系移植組為對(duì)照組,Brown-Norway大鼠-Lewis大鼠異系移植組為實(shí)

3、驗(yàn)組.術(shù)后15、30、60天切取移植段動(dòng)脈,檢測(cè)移植動(dòng)脈的病理變化. 結(jié)果：大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型成功建立,手術(shù)成功率70.0﹪.對(duì)照組術(shù)后15、30、60天,血管內(nèi)膜均無明.顯變化.實(shí)驗(yàn)組術(shù)后15天出現(xiàn)少量炎性細(xì)胞.30天開始出現(xiàn)血管內(nèi)膜增厚,60天內(nèi)膜明顯增厚,出現(xiàn)典型的慢性移植物血管病病理改變.大鼠移植動(dòng)脈60天病理組織學(xué)表現(xiàn)具有內(nèi)膜增生,中層細(xì)胞壞死、遷移,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)大特點(diǎn). 結(jié)論：建立Brown-N

4、orway大鼠和Lewis大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型,可復(fù)制出類似于人類慢性移植物血管病病理變化,是一種理想的研究慢性排斥反應(yīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ? 第二部分染料木黃酮對(duì)大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病的實(shí)驗(yàn)研究 目的：研究染料木黃酮對(duì)大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病的影響,并探討其作用機(jī)理. 方法：①建立Brown-Norway大鼠-Lewis大鼠腹主動(dòng)脈慢性移植物血管病模型. ②實(shí)驗(yàn)分為4組:對(duì)照組Grou

5、p A:Lewis大鼠-Lewis大鼠(n=10):生理鹽水(0.2ml/d),皮下注射60天.對(duì)照組Group B:Brown-Norway大鼠-Lewis大鼠(n=10):生理鹽水(0/2ml/d),皮下注射60天.實(shí)驗(yàn)組Group C:Brown-Norway大鼠-Lewis大鼠(n=10):DMSO(0.2mlM),皮下注射60天.實(shí)驗(yàn)組Group D:Brown-Norway大鼠-Lewis大鼠(n=10):染料木黃酮(60m

6、g/kg,0.2ml/d),皮下注射60天. ③移植后60天切取4組移植段腹主動(dòng)脈進(jìn)行HE染色組織形念學(xué)觀察移植段動(dòng)脈內(nèi)膜變化;檢測(cè)動(dòng)脈移植物ICAM-1(CD54)、VEGF免疫組化表達(dá). 結(jié)果：①移植后60天,GroupA移植動(dòng)脈形態(tài)正常,Group B、C、D呈慢性移植物血管病表現(xiàn),血管內(nèi)膜顯著增厚,與Group A比較內(nèi)膜明顯增厚,具有顯著性差異(P<0.01);Group C、D移植動(dòng)脈血管呈內(nèi)膜炎改變,與Gr

7、oup B比較內(nèi)膜增厚程度減少(均與Group A血管厚度相差),具有顯著性差異(P<0.01);Group D與Group C相比內(nèi)膜增厚程度減少(均與GroupA血管厚度相差),具有顯著性差異(P<0.01). ②Group A、B、C、D移植動(dòng)脈ICAM-1(CD54)、VEGF免疫組化顯示:Group D與Group B和Group C相比,ICAM-1(CD54)、VEGF表達(dá)下調(diào),Group C與Group B相比,