雷公藤內(nèi)酯醇經(jīng)NF-κB途徑防治心臟移植物血管病的研究.pdf

1、第一部分運(yùn)用套管法建立胸主動(dòng)脈腹腔移植模型
　　目的：尋找一種可模擬心臟移植物血管病發(fā)病機(jī)制，同時(shí)簡(jiǎn)單易學(xué)、可復(fù)制性強(qiáng)、存活率高的動(dòng)物模型。
　　方法：利用自制套管，將供體胸主動(dòng)脈套入套管并將其移植至受體的腹主動(dòng)脈中。將30只受體SD系大鼠隨機(jī)分成2組，分別接受供體Wistar系和SD系大鼠的胸主動(dòng)脈移植，構(gòu)建同基因移植組（SD To SD）（A組）和異基因移植組（Wistar To SD）（B組）大鼠各15只。術(shù)前、術(shù)后均

2、禁食12小時(shí)，可自由飲水。以麻醉清醒后四肢能自由活動(dòng)，可自由飲水為手術(shù)成功標(biāo)志。于7、28及56天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)，取各移植動(dòng)脈標(biāo)本（n=5）行病理檢查觀察其病理變化，并用計(jì)算機(jī)圖像系統(tǒng)分析血管內(nèi)膜增厚程度。
　　結(jié)果：B組動(dòng)脈內(nèi)膜從28天起增厚，56天時(shí)增厚明顯，與A組及正常對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），而 A組與正常對(duì)照組相比各時(shí)間點(diǎn)均無(wú)顯著差異（p>0.05）。B組56天時(shí)的病理變化主要是單核巨噬細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)在內(nèi)

3、膜積聚，中膜平滑肌細(xì)胞增殖并向內(nèi)膜遷移，致內(nèi)膜呈彌漫―同心圓‖樣增厚。B組動(dòng)脈內(nèi)膜改變與心臟移植物血管病相類(lèi)似。
　　結(jié)論：運(yùn)用套管法建立胸主動(dòng)脈腹腔移植模型來(lái)模擬心臟移植物血管病是簡(jiǎn)便、可行的。該模型可用于心臟移植物血管病發(fā)病機(jī)制及其防治措施的研究。
　　第二部分雷公藤內(nèi)酯醇經(jīng)NF-κB信號(hào)通路防治心臟移植物血管病的研究
　　目的：觀察雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)于心臟移植物血管病發(fā)展的影響，并探究雷公藤內(nèi)酯醇阻斷NF-κB及其下

4、游分子表達(dá)的機(jī)制。
　　方法：30只SD大鼠做受體，30只Wistar大鼠做供體，利用第一部分的方法建立異基因胸主動(dòng)脈腹腔移植模型后，隨機(jī)分成2組，分別為C組（雷公藤內(nèi)酯醇干預(yù)組）：Wistar大鼠胸主動(dòng)脈移植至SD大鼠腹主動(dòng)脈，術(shù)后第1天起，雷公藤內(nèi)酯醇（200μg/kg/天）灌胃；D組（雷帕霉素干預(yù)組）：Wistar大鼠胸主動(dòng)脈移植至SD大鼠腹主動(dòng)脈，術(shù)后第1天起，雷帕霉素（1.25mg/kg/天）灌胃；每組各15只；于術(shù)后第

5、7、28、56天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)（n=5），留取移植血管后處死大鼠。移植血管行病理染色觀察血管病理情況，行免疫組織化學(xué)染色觀察NF-κB、NOS2、VCAM-1及ICAM-1的表達(dá)情況，第一部分標(biāo)本為對(duì)照組。
　　結(jié)果：
　　1.在28、56天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，雷公藤內(nèi)酯醇干預(yù)組（C組）及雷帕霉素干預(yù)組（D組）血管內(nèi)膜厚度與同基因移植組（A組）及異基因移植組（B組）比較均有顯著差異（p<0.05），C、D組內(nèi)膜厚度比較無(wú)顯著差異（p>0

6、.05）；C、D組病理學(xué)改變與B組相似，但內(nèi)膜增生、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、平滑肌細(xì)胞增殖及遷移明顯減少，但較A組明顯。
　　2. A、B組血管內(nèi)皮細(xì)胞中均表達(dá)NF-κB p65及NOS2，B組較A組表達(dá)明顯增強(qiáng)，積分光密度值相比有顯著差異（p<0.05）；C組NF-κB p65、VCAM-1、ICAM-1及NOS2在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)明顯減弱，積分光密度值與A組及B組比較均有顯著差異（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1. NF-