M膽堿受體在GER性氣道炎癥中的作用及機制.pdf

1、胃食管反流(gastroesophageal reflux,GER)除可引起食管炎癥損傷外,還可引起慢性氣道炎癥疾病如哮喘,并加重慢性阻塞性肺疾病的癥狀。普遍認為GER性氣道炎癥藉反流和神經(jīng)反射二種可能機制所引起,非神經(jīng)源性膽堿系統(tǒng)和神經(jīng)源性膽堿系統(tǒng)在炎癥產(chǎn)生中起重要作用。在炎癥區(qū)域乙酰膽堿ACh濃度高于正常,這可能是由于胃內(nèi)容物通過反流作用于氣道,刺激ACh的旁分泌；以及GER通過神經(jīng)反射后引起ACh釋放增加。雖然ACh激動N膽堿受體

2、(α7亞型)介導膽堿能抗炎途徑已是近年共識,而ACh介導炎癥產(chǎn)生的膽堿受體與信號通路的了解十分有限,較多研究的關(guān)注點在ACh作用于免疫細胞M膽堿受體影響炎癥趨化因子的釋放,而GER性氣道炎癥中ACh對氣道結(jié)構(gòu)細胞M膽堿受體介導作用不明確。因此,本研究在國內(nèi)外率先建立小鼠GER性慢性氣道炎癥的模型；從整體水平上探索了M膽堿受體在神經(jīng)源性和非神經(jīng)源性膽堿系統(tǒng)介導GER性慢性氣道炎癥中作用；以及在細胞和分子水平上探討了M膽堿受體及其亞型對氣道

3、結(jié)構(gòu)細胞炎癥介質(zhì)釋放以及NF-κB信號通路的影響。
　　 在建立豚鼠GER模型基礎上,通過外源性酸造模法建立小鼠GER性慢性氣道炎癥的模型,形態(tài)學觀察表明模型動物的食管和肺的組織和細胞形態(tài)改變符合慢性病理炎癥特征,功能性測定表明模型動物的氣道呈現(xiàn)高反應特征并為抗炎藥地塞米松所改善。在此模型基礎上,通過病理學和相關(guān)炎癥介質(zhì)IL-8或ICAM-1的釋放和表達的研究,證明M(特別是M3)膽堿受體拮抗劑在整體水平上對神經(jīng)源性和非神經(jīng)源性

4、膽堿系統(tǒng)介導GER性慢性氣道炎癥有明顯的抗炎作用,其抗炎強度與地塞米松相似。通過細胞生物學和高內(nèi)涵分析發(fā)現(xiàn),在脂多糖(LPs)單獨或與卡巴膽堿(CCh)共同刺激下肺泡上皮細胞(A549)能大量釋放IL-8,NF-κB的活化并促進核轉(zhuǎn)位,而M(特別是M3)膽堿受體拮抗劑能顯著阻斷其作用,然而單獨CCh不足以刺激A549細胞釋放IL-8和NF-κB核轉(zhuǎn)位,但可明顯增強LPS的作用。提示M膽堿受體及其M3膽堿受體亞型對LPS介導氣道上皮細胞的