自體骨髓源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的蛋白質(zhì)組學(xué)分析.pdf

1、背景:戰(zhàn)爭(zhēng)創(chuàng)傷、交通意外、自然災(zāi)害以及腦血管意外都會(huì)造成大量神經(jīng)系統(tǒng)損傷的患者,中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷預(yù)后較差,常給患者留下難以恢復(fù)的癥狀如截癱、偏癱、失語(yǔ)、視力障礙等。給患者本人生活造成極大的困難,給患者家庭帶來(lái)沉痛的負(fù)擔(dān)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的治療是神經(jīng)外科的一大難點(diǎn),目前常規(guī)藥物以及物理療法效果不盡如人意。自體骨髓源神經(jīng)干細(xì)胞移植是治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的一個(gè)新的思路,具有廣闊的前景,但是目前神經(jīng)干細(xì)胞移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷早期療效不顯著,

2、不利于臨床觀察。而蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)發(fā)展為解決此問(wèn)題提供了一個(gè)新的方法,使用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析腦脊髓損傷患者接受神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)前組、接受神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)后組、正常對(duì)照組以及假手術(shù)組患者腦脊液中的蛋白質(zhì)組學(xué)的變化,進(jìn)一步研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷患者腦脊液的蛋白質(zhì)組學(xué),并期望以此來(lái)評(píng)價(jià)神經(jīng)干細(xì)胞移植早期療效。
　　目的:
　　1.初步探討腦脊液蛋白質(zhì)組學(xué)與神經(jīng)功能的關(guān)系。
　　2.進(jìn)一步研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的腦脊液蛋白質(zhì)組學(xué)。

3、
　　3.應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法研究分析干細(xì)胞移植對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的療效。
　　方法:
　　一.收集正常成人40例(組1,n=40,114標(biāo)記)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷患者40例(組2,n=40,115標(biāo)記)、以上患者術(shù)后一周時(shí)腦脊液(組3,n=40,116標(biāo)記),以及神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液5ml(組4,117標(biāo)記);二.正常成人40例(組1,n=40,114標(biāo)記),假手術(shù)組40例術(shù)前、術(shù)后(組5,n=40,分別用114、11

4、5標(biāo)記),組內(nèi)等量混合后利用高效液相色譜柱去除高豐度蛋白,樣本經(jīng)iTRAQ試劑標(biāo)記后利用二維色譜分離,經(jīng)串聯(lián)質(zhì)譜鑒定以及相對(duì)定量,并從蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索蛋白質(zhì)。
　　結(jié)果:
　　質(zhì)譜得到的多肽片段,經(jīng)譜庫(kù)搜索鑒定的蛋白共59個(gè),神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)前組與正常對(duì)照組存在差異的蛋白質(zhì)有13個(gè),其中有5個(gè)蛋白質(zhì)呈高表達(dá),8個(gè)呈低表達(dá)。以上13個(gè)蛋白質(zhì)中有7個(gè)蛋白質(zhì)在神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)后組與正常對(duì)照組表達(dá)無(wú)差異;假手術(shù)術(shù)前組表達(dá)與神經(jīng)干細(xì)

5、胞移植術(shù)前組無(wú)明顯差異,假手術(shù)組術(shù)前術(shù)后無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:蛋白質(zhì)在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)生、轉(zhuǎn)化過(guò)程中起到非常重要的作用,通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)的方法可以有效分析CSF中各種蛋白質(zhì)的變化情況,為了解神經(jīng)系統(tǒng)生理病理變化提供了一個(gè)非常重要的工具,可以發(fā)現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)微觀、定性以及半定量的變化,為疾病的早期診斷以及療效評(píng)價(jià)提供了基礎(chǔ)。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)自體骨髓源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的療效比較肯定,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷治療的一個(gè)非常有前景的治療方