菜籽蛋白酶解及產(chǎn)物抗氧化活性的研究.pdf

1、油菜籽加工油脂過程中的副產(chǎn)品菜籽粕具有廣闊的應(yīng)用前景，然而由于菜籽粕中硫代葡萄糖苷以及其他一些抗?fàn)I養(yǎng)因子的存在，使菜籽粕的合理利用受到制約。本文研究了超聲微波輔助提取菜籽蛋白的工藝、雙酶分步酶解制備菜籽肽的工藝、菜籽蛋白酶解物的脫色及分子量分布范圍，同時(shí)比較了三種不同分子量的菜籽蛋白酶解物的抗氧化能力，從中選出抗氧化能力較強(qiáng)的菜籽蛋白酶解物進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 （1）選用雙低菜籽粕為原料，采用超聲微波輔助

2、提取的方法，通過對(duì)各種單因素的分析得到基本工藝條件，根據(jù)Box-Benhnken的中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原則，選取對(duì)提取菜籽蛋白影響較大的3個(gè)因素：微波功率、提取時(shí)間和料液比值進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面分析，得到制備菜籽蛋白的最佳工藝條件為：pH為11.5，微波功率73 W，料液比1：28，提取時(shí)間484秒，在此條件下提取3次，產(chǎn)品蛋白含量83.67％，蛋白得率38.76％。
　　 （2）實(shí)驗(yàn)選取Alcalase堿性蛋白酶和復(fù)合風(fēng)味蛋白酶分步水

3、解菜籽蛋白，結(jié)果表明雙酶分步水解制備菜籽肽的最佳工藝為Alcalase堿性蛋白酶在pH9.5，溫度55℃，底物濃度3％，酶濃度5500u/g條件下酶解5.5小時(shí)，水解度為21.14％，再用復(fù)合風(fēng)味酶在pH6，溫度50℃，酶濃度900u/g條件下繼續(xù)酶解3小時(shí)，酶解液中游離氨基氮達(dá)到1.31mg/ml，且酶解液苦味值最低。
　　 （3）研究粗肽液用活性炭脫色得到最佳的脫色條件：活性炭用量1.5％，pH4.5，溫度55℃，脫色50m

4、in，脫色率可達(dá)32.15％，氨基酸損失率25.12％。將脫色后的菜籽蛋白酶解物進(jìn)行高效液相色譜和質(zhì)譜分析表明：菜籽蛋白酶解物主要是由1000Da以下的小分子肽組成。
　　 （4）通過比較研究三種菜籽蛋白酶解物的抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)組分3的抗氧化的效果最好，抗氧化能力最強(qiáng)。于是進(jìn)一步研究菜籽蛋白酶解物（RPHs）對(duì)在拘束應(yīng)激狀態(tài)下的小鼠抗氧化作用。48只昆明系小鼠分為4組：空白組、拘束應(yīng)激模型組、菜籽肽低劑量組和菜籽肽高劑量組?？瞻?/p>