螺旋藻蛋白酶解工藝的優(yōu)化及抗氧化肽的分離鑒定.pdf

1、生物活性肽是由氨基酸組成的具有生物活性的肽類化合物，一般是以植物或動物蛋白為原料制成。我國優(yōu)質(zhì)蛋白資源匱乏，高蛋白含量的生物活性肽作為一種新型蛋白資源，具有抗菌性、調(diào)節(jié)血清中血脂水平、促吸收、降血壓等功能，同時還能增強機體免疫力、調(diào)節(jié)有機體生理機能。本課題以螺旋藻為主要原料，對螺旋藻蛋白酶解工藝、產(chǎn)品營養(yǎng)成分以及螺旋藻抗氧化組分分離鑒定進行研究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴以螺旋藻為原料，選用蛋白酶K對其水解制備高活性多肽，確定最

2、佳酶解工藝條件:料水比1∶8、酶添加量700 U/g、酶解溫度55℃、pH值8.5，酶解時間3h。最佳條件下多肽轉(zhuǎn)化率為43.31％，氨基酸轉(zhuǎn)化率為11.82％，酶解液主要為2～7個氨基酸殘基組成的多肽混合物。⑵根據(jù)優(yōu)化的最佳工藝條件，進行酶解放大實驗，對酶解放大實驗的產(chǎn)品進行營養(yǎng)成分的分析。酶解后產(chǎn)品粗蛋白含量為66.55％，多肽含量為27.35％。原料中分子量＞350 KDa的蛋白占69.16％，酶解后占12.99％;原料中分子量＜

3、1KDa的多肽占28.33％，酶解后占62.60％。產(chǎn)品分子量主要分布在613 Da，約6個氨基酸殘基。⑶對螺旋藻酶解液進行生理活性分析，發(fā)現(xiàn)酶解液具有較強的抗氧化性，分子量小于3 KDa的螺旋藻酶解液抗氧化活性最高，當濃度為100 mg/mL時DPPH自由基清除率可達到92.25％。通過凝膠過濾層析、反相高效液相(RP-HPLC)等技術(shù)手段對該分子量范圍的螺旋藻粗肽進行分離純化，獲得一種高活性的抗氧化肽。經(jīng)鑒定該抗氧化肽的氨基酸序列為