乳清蛋白酶解及其產(chǎn)物分析方法研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、由于乳清蛋白的營養(yǎng)價值、功能特性及其過敏性，乳清蛋白功能性食品和低過敏制品日益受到人們的關(guān)注。本文以乳清蛋白中的主要成分α-乳白蛋白和β-乳球蛋白為研究對象，研究了以下內(nèi)容。 試驗建立了同時測定乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的高效液相色譜分析方法。采用KromasilC8色譜柱(5μm，250mm×4.6mm)，流動相A為0.1％的三氟乙酸-水溶液，流動相B為0.09％的三氟乙酸-乙腈溶液梯度洗脫，流速為0.8mL/m

2、in，二極管陣列檢測器，檢測波長：215nm，柱溫：30℃。外標(biāo)法定量，α-乳白蛋白和β-乳球蛋白兩種組分線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)分別為0.9998和0.9984，檢測限為3μg/mL和10μg/mL。加標(biāo)回收率分別為92.3～95.6％，RSD分別為0.5％～3.9％。方法簡便、快速、準(zhǔn)確，是α-乳白蛋白和β-乳球蛋白定量測定的可靠方法之一。 試驗建立了定量測定α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的SDS-PAGE電泳方法。研究了α-乳白

3、蛋白和β-乳球蛋白上樣的線性范圍分別為0.25～1.75μg和0.16～1.44μg，在該上樣量范圍內(nèi)其含量與總灰度值呈良好的線形關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.9940和0.9912。 采用Alcalase2.4L、Papain18、Flavourzyme500MG、Protamex、中性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶七種蛋白酶對乳清蛋白粉進(jìn)行水解，通過HPLC方法測定酶解產(chǎn)物中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的酶解率最終篩選出Alcalase

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