三氯化鋁對體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞的毒性作用.pdf

1、以體外培養(yǎng)的新生SD乳鼠成骨細(xì)胞(OB)為實驗對象，在培養(yǎng)體系加入終濃度為0.063mg/mL(低劑量染鋁組，GL)、0.126 mg/mL（中劑量染鋁組，GM）、0.252 mg/mL（高劑量染鋁組，GH）和0 mg/mL（對照組，GC）的三氯化鋁(AlCl3)，培養(yǎng)24h后，應(yīng)用CCK-8比色法檢測細(xì)胞增殖率;比色法和放射免疫分析法分別檢測OB培養(yǎng)液中堿性磷酸酶(ALP)活性和骨鈣素(BGP)含量;Fura-2/AM熒光法檢測OB內(nèi)

2、鈣離子濃度([Ca2+]i);定磷法檢測Ca2+-ATPase活性;半定量RT-PCR法檢測Ⅰ型膠原(CoLⅠ)、BGP mRNA表達(dá)量;實時熒光定量PCR檢測鈣調(diào)蛋白(CaM) mRNA表達(dá)量;Western blot法檢測CaM蛋白表達(dá)量，旨在探討鋁對OB的毒性作用，實驗結(jié)果表明:
　　 1.AlCl3對大鼠OB的半數(shù)抑制濃度(IC50)為1.26±0.02 mg/mL。
　　 2.隨AlCl3濃度的升高，OB的增殖

3、率呈下降趨勢，染鋁組與GC比較差異顯著(p＜0.01)，說明AlCl3可抑制OB的活性。
　　 3.染鋁組OB CoLⅠ和BGP mRNA表達(dá)量均低于GC，其中，GM和GH差異極顯著（P＜0.01）;染鋁組ALP活性顯著低于GC(p＜0.05; p＜0.01)，且隨AlCl3濃度升高呈下降趨勢，呈劑量-效應(yīng)關(guān)系;OB培養(yǎng)液中BGP含量隨AlCl3濃度升高呈下降趨勢，GH極顯著低于GC(p＜0.01)，說明GM、GH的AlCl3可