三氯化鋁抑制大鼠成骨細(xì)胞的TGF-β1-Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以3日齡SD大鼠顱骨成骨細(xì)胞(OB)為研究對象，向傳代培養(yǎng)至第三代的OB中分別添加終濃度為0mg/mL（對照組，CG）、0.06mg/mL（低劑量組，LG）、0.12mg/mL（中劑量組，MG）、0.24mg/mL（高劑量組，HG）的AlCl3·6H2O培養(yǎng)24h，采用qRT-PCR技術(shù)檢測第三代OB中ALP、ColⅠ、TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad4、Smad7 mRNA的表達(dá)、western blot方法檢測TGF

2、-β1、p-Smad2/3、p-ERK、p-JNK、p-p38蛋白的表達(dá)，免疫共沉淀法檢測p-Smad2/3/4復(fù)合物的形成及其入核情況，旨在探討鋁抑制OB的TGF-β1/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，結(jié)果表明:
　　(1)染鋁組大鼠OB中ALP、ColⅠ mRNA表達(dá)量均顯著低于對照組(P＜0.05，P＜0.01)，說明AlCl3抑制OB的活性與功能。
　　(2)染鋁組大鼠OB中TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad4 mRN

3、A表達(dá)量，TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表達(dá)量顯著低于對照組(P＜0.05，P＜0.01)，Smad7 mRNA表達(dá)量顯著高于對照組(P＜0.05，P＜0.01)，說明AlCl3抑制OB中TGF-β1/Smad信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。
　　(3)染鋁組大鼠OB中p-ERK、p-JNK、p-p38蛋白表達(dá)量顯著低于對照組(P＜0.05，P＜0.01)，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中p-Smad2/3/4表達(dá)量顯著低于對照組（P＜0.05，P＜0

4、.01）;各染鋁組細(xì)胞核中p-Smad2/3/4表達(dá)量顯著低于細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)量（P＜0.05，P＜0.01），而對照組細(xì)胞核中p-Smad2/3/4表達(dá)量與細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)量相比差異不顯著（P＞0.05）。說明AlCl3通過抑制OB中JNK、ERK、p38的磷酸化，進(jìn)而抑制p-Smad2/3/4的形成及其轉(zhuǎn)位入核，抑制TGF-β1/Smad信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。
　　上述結(jié)果說明，AlCl3可抑制大鼠OB中TGF-β1/Smad信號通路的