BMMSC對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠淋巴細(xì)胞增殖影響的機(jī)制研究.pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis，UC)是一種病因尚不明確的非特異性炎癥性疾病，病程呈慢性且容易復(fù)發(fā)，遷延不愈。目前治療方法單一且效果欠佳。隨著我國(guó)該病的發(fā)病率逐漸升高的趨勢(shì)，探索新型的治療方法勢(shì)在必行。國(guó)外早先初次報(bào)道造血干細(xì)胞治療非霍奇金淋巴瘤合并潰瘍性結(jié)腸炎后，患者UC的癥狀得到良好緩解。而近年來發(fā)現(xiàn)，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞因其極低的免疫原性和極強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)抑制能力成為治療更有力的候選者。但多方研究仍未就MSC發(fā)揮作用

2、的靶點(diǎn)及途徑等諸多問題達(dá)成一致。本實(shí)驗(yàn)旨在討論P(yáng)D-1通路在MSC對(duì)免疫系統(tǒng)特別是淋巴細(xì)胞數(shù)量方面的影響以佐證MSC發(fā)揮作用所通過的細(xì)胞接觸途徑。
　　 材料與方法
　　 建立DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型，進(jìn)行DAI臨床評(píng)分。用貼壁法培養(yǎng)獲得雄性SD大鼠的MSCs，連續(xù)傳代純化，并進(jìn)行流式鑒定。從潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的脾臟取出分離淋巴細(xì)胞，并用CFSE對(duì)其進(jìn)行標(biāo)記，將標(biāo)記后的淋巴細(xì)胞分為AB兩組。MSC經(jīng)致死量輻照后分為

3、AB兩組，A組加入PD-1及PDL-1抗大鼠抗體，B組加入等量的IgG同型抗體。將A組MSC與A組淋巴細(xì)胞按1∶3的比例共同培養(yǎng)，B組MSC與B組淋巴細(xì)胞按1∶3的比例共同培養(yǎng)。72小時(shí)后流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)AB兩組細(xì)胞560nm激發(fā)光下的數(shù)量。
　　 結(jié)果：
　　 1.模型大鼠表現(xiàn)出實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的癥狀及表現(xiàn)，造模成功。
　　 2.MSC與脾淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)后，A組與B組脾淋巴細(xì)胞數(shù)量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)